[發明專利]一種提取大豆種子DNA的方法無效
| 申請號: | 201110320948.1 | 申請日: | 2011-10-20 |
| 公開(公告)號: | CN102344922A | 公開(公告)日: | 2012-02-08 |
| 發明(設計)人: | 王存芳;劉天明 | 申請(專利權)人: | 山東輕工業學院 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人: | 楊琪 |
| 地址: | 250353 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 提取 大豆 種子 dna 方法 | ||
1.一種提取大豆種子DNA的方法,其特征在于,步驟如下:
(1)取適量大豆種子,粉碎,待用;
(2)取0.1g上述粉末,置于1.5ml離心管中,加入100ul?20%的SDS溶液、500ul?CTAB提取緩沖液和4ul蛋白酶K,充分混勻后,放入60~65℃恒溫水浴鍋中消化60min,期間每10min顛倒混勻一次;
(3)加入36ul?5mol/L的KAC,混勻,冰浴30min,10000~12000r/min離心10min;
(4)取上述離心后的上清液,置于另一離心管中,加入等體積的氯仿/異戊醇,輕柔顛倒混勻10min,10000~12000r/min離心10min;
(5)取上述離心后的上清液,沿管壁緩慢旋轉加入等體積-20℃預冷的異丙醇,室溫下沉淀,10000~12000r/min離心3min;
(6)棄去上述離心后的上清液,用500ul?70%乙醇洗滌沉淀3次,即得大豆種子DNA。
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