[發(fā)明專利]測定肝微粒體中NNK代謝物的液質聯(lián)用方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110319620.8 | 申請日： | 2011-10-20 |
| 公開（公告）號： | CN102445510A | 公開（公告）日： | 2012-05-09 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張建勛;王娟;盧斌斌;王昇;趙貝貝;宗永立;李鵬;孫世豪 | 申請（專利權）人： | 中國煙草總公司鄭州煙草研究院 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N27/62 |
| 代理公司： | 鄭州中民專利代理有限公司 41110 | 代理人： | 姜振東 |
| 地址： | 450001 *** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 測定 微粒體 nnk 代謝物 聯(lián)用 方法 | ||
1.測定肝微粒體中NNK代謝物的液質聯(lián)用方法，其特征在于：包括以下步驟：
（1）肝微粒體孵育體系的配制
孵育：取離心管，依次加入孵育液B，孵育液A，所需濃度的NNK，補加磷酸鹽緩沖溶液配成肝微粒體孵育體系；
反應：將離心管置于37.0?℃水浴中5?min，加入肝微粒體，輕搖孵育體系使之均勻后不再晃動，置于37.0?℃水浴中靜止反應30?min；
（2）樣品處理：取出反應產(chǎn)物，加入預冷的內(nèi)標乙腈溶液終止反應，放于4℃冰箱中保存60?min使蛋白沉淀，3500?rpm離心10?min，取上清再于10000?rpm離心5?min，上清液過0.22?μm濾膜后進樣2?μL分析；
（3）樣品分析,進行肝微粒體中NNK代謝物測定，具體條件如下：
色譜條件：
色譜柱：?HILIC?Silica柱；流動相：A：水（含10?mM甲酸銨），B：乙腈；流速：500?μL/min；洗脫方式：梯度洗脫；進樣量：2?μL；柱溫：26?℃；
質譜條件：
電離模式：電噴霧電離（ESI）；掃描模式：正離子掃描；檢測方式：多反應監(jiān)測（MRM）；電噴霧電壓（IS）：5500?V；離子源溫度（TEM）：600?℃；霧化氣（GS1,?N2）：65?psi；輔助加熱氣（GS2?,?N2）：60?psi；氣簾氣（Curtain?gas,?CUR,?N2）：35?psi；碰撞氣（Collision?gas,?CAD,?N2）：8?psi；駐留時間（Dwell?Time）：50?ms；入口電壓EP（Entrance?Potential）：10?V；出口電壓CXP（Collision?Cell?Exit?Potential）：12?V。
2.根據(jù)權利要求1所述的測定肝微粒體中NNK代謝物的液質聯(lián)用方法，其特征在于：所使用的色譜柱為美國Waters公司的Waters?Atlantis?HILIC?Silica柱，型號為3.0×100?mm，3?μm。
3.根據(jù)權利要求1所述的測定肝微粒體中NNK代謝物的液質聯(lián)用方法，其特征在于：步驟（3）中的梯度洗脫條件如下表：
液相色譜梯度洗脫條件
。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國煙草總公司鄭州煙草研究院，未經(jīng)中國煙草總公司鄭州煙草研究院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權和技術合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201110319620.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
