[發明專利]豬氟烷基因快速分型試劑盒及其檢測方法無效
| 申請號： | 201110313908.4 | 申請日： | 2011-10-17 |
| 公開（公告）號： | CN102559865A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發明（設計）人： | 馬繼登;李明洲;李學偉 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 625014 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 烷基 快速 試劑盒 及其 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種豬氟烷基因快速分型試劑盒，其特征在于，包括引物預混液、HRM?PCR預混液和Nuelease-free?dH2O；
其中所述引物預混液：混合液中兩條引物濃度均為10μM，引物序列如下：
上游引物：GTTCCCTGTGTGTGTGCAATGGT
下游引物：GCCAGGGAGCAAGTTCTCAGTAATG
所述HRM?PCR預混液：成分及體積比例如下：
HotStar?Taq?DNA?Polymerase(5U/μl)∶10×PCR?Buffer(Mg2+Plus)∶dNTPMixture(各2.5mM)∶EvaGreen?dye(1.2μM)＝1∶1∶2∶6。
2.一種豬氟烷基因快速分型檢測方法，包括以下步驟：
步驟1：將引物預混液、HRM?PCR預混液、Nuclease-free?dH2O以及提前抽提好的DNA樣本從-20℃冰箱中取出并在冰上融化；
步驟2：配制反應預混液；預混液體積根據待檢樣本的數量而定；
步驟3：將反應預混液混合均勻，并根據所需的體積分裝到PCR管中；
步驟4：向分裝好反應預混液的PCR中添加樣本DNA模板，并輕輕混勻；
步驟5：根據優化程序，調置好熒光定量儀的工作程序；
步驟6：將配制好的PCR管放到熒光定量PCR儀上，啟動HRM程序；
步驟7：數據分析。
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