[發明專利]用于海綿共生土曲霉發酵制備Terrein的培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 201110311460.2
• 申請日: 2011-10-14
• 公開（公告）號: CN102559780A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 殷穎;李志勇;張鳳麗;高強
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12P7/38
• 分類號: C12P7/38;C12R1/66
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 郭國中

技術領域

本發明涉及一種真菌培養技術領域的培養基及其制備方法，具體是一種海綿共生土曲霉發酵制備Terrein的培養基及其制備方法。?

背景技術

Terrein（土曲霉酮）是一種環戊烯酮類化合物，最初由土曲霉發酵得到，盡管發現距今已有70余年，但它的許多活性卻是直到本世紀才被陸續發現的。Terrein的活性十分多樣，不僅具有抗細菌、真菌、雜草的活性，還可以抑制腫瘤細胞血管新生素的分泌，抑制黑色素合成，抑制皮膚角質增生，抑制牙髓細胞炎癥反應，促進成骨細胞與鈦支架融合等。可以預見Terrein將來在醫療、美容、農業等眾多領域會有良好的應用前景，當然前提是Terrein的制備技術取得突破。?

然而現有的Terrein制備方法都存在一些不足。首先，一些化學合成制備Terrein的技術往往有總產率低，需要采用高溫高壓等極端反應條件，需要昂貴的反應試劑，或是終產物不具備立體結構的選擇性等缺點（Lee?S,?et?al.?Synthesis?and?melanin?biosynthesis?inhibitory?activity?of?(±)-terrein?produced?by?Penicillium?sp.?20135.?Bioorganic?and?Medicinal?Chemistry?Letters?2005;15:471-473）。其次，采用微生物發酵制備Terrein的技術產量又十分有限，少則數百μg/L（Phattanawasin?P,?et?al.?Weed?growth?inhibitors?from?Aspergillus?fischeri?TISTR?3272.?Natural?Product?Research?2007;21:1286-1291），多則數百mg/L（M.?Demasi,?et?al.?Studies?on?Terrein?as?a?New?Class?of?Proteasome?Inhibitors.?Journal?of?the?Brazilian?Chemical?Society?2010;21:229-305），而未能達到具備生產價值的g/L量級。?

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的上述缺點，提供一種海綿共生土曲霉發酵制備Terrein的培養基及其制備方法。采用本發明的方法對海綿共生土曲霉產Terrein的培養基成分進行了優化，使得Terrein的產量有明顯提高。?

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：?

本發明涉及一種用于海綿共生土曲霉發酵制備Terrein的培養基，所述培養基包括：葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、麥芽提取物、谷氨酸鈉、氯化銨以及人工海水。

優選的，所述海綿共生土曲霉為土曲霉（Aspergillus?terreus）PF26?CGMCC?NO.5208。?

優選的，所述培養基具體為：當培養基中含有的人工海水為1L時，培養基含有葡萄糖28.41g、麥芽糖23.18g、甘露醇20.00g、麥芽提取物8.52g、谷氨酸鈉10.00g、氯化銨10.00g。?

優選的，所述人工海水具體為，人工海水由以下質量的各組份：氯化鈉?26.518g、氯化鎂?2.447g、硫酸鎂?3.305g、氯化鈣_??1.141g、氯化鉀?0.725g、碳酸氫鈉_??0.202g、溴化鈉?0.083g，溶解于1L蒸餾水中組成；所述人工海水的pH值為7.0～7.2。?

本發明還涉及一種上述的用于海綿共生土曲霉發酵制備Terrein的培養基的制備方法，包括以下步驟：?

第一步，配制人工海水；

第二步，在配制好的人工海水中加入葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、麥芽提取物、谷氨酸鈉和氯化銨并攪拌溶解，然后進行高溫殺菌得到培養基。

優選的，第二步中，所述培養基具體為，當培養基含有的人工海水為1L時，培養基含有葡萄糖28.41g、麥芽糖23.18g、甘露醇20.00g、麥芽提取物8.52g、谷氨酸鈉10.00g、氯化銨10.00g。?

優選的，第一步中，所述配制人工海水具體為，配置人工海水包括如下步驟：將26.518g氯化鈉、2.447g氯化鎂、3.305g硫酸鎂、1.141g氯化鈣_??、0.725g氯化鉀、0.202g?碳酸氫鈉以及0.083g溴化鈉溶解于1L蒸餾水中，即得，?所述配制好的人工海水的pH值為7.0～7.2。?