[發明專利]一種鹽地堿蓬黃酮提取及含量測定方法

無效

• 申請號: 201110311002.9
• 申請日: 2011-10-08
• 公開（公告）號: CN103027962A
• 公開（公告）日: 2013-04-10
• 發明（設計）人: 劉德駒;金紹娣;張偉
• 申請（專利權）人: 鹽城紡織職業技術學院
• 主分類號: A61K36/70
• 分類號: A61K36/70;G01N30/36;A61P1/14;A61P29/00;A61K127/00;A61K135/00
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技術領域

本發明涉及一種海濱藜科植物-鹽地堿蓬黃酮提取以及含量測定方法研究，屬于天然產物提取及含量測定領域。?

背景技術

堿蓬，俗稱嫩苗稱“狼尾巴條”、常稱為“海英菜”、“堿蒿”、“鹽蒿”，一年生草本，莖直立，圓柱形，高達30～100厘米，花單生或2～3朵有柄簇生于葉腋的短柄上，呈團傘狀，花被于果期呈五角星狀，正常年份3月上中旬至6月上旬都可出苗，出土子葉鮮紅。7～8月為花期，9～10月為結實期，11月初種子完全成熟。成熟時植株火紅，極具觀賞價值。是典型鹽生植物，其栽培技術比較粗放，主要分布于東北、西北、華北和河南、山東、江蘇、浙江等地。堿蓬的商品性好，堿蓬株型美觀，有“翡翠珊瑚”的雅稱；鮮嫩莖葉營養豐富，具有特別的海鮮味，口感好，切可入藥主治食積停滯、發熱等。?

黃酮類化合物是一類廣泛存在于植物體內的天然產物，基本結構為C₆-C₃-C₆，在植物體內大部分與糖結合成苷，部分以游離形式存在，因具有抗病毒、抗癌、抗氧化、抗炎、抗衰老等生理和藥理活性，而成為國內外研究的熱點課題。研究發現，鹽地堿蓬(S.salsa)葉總黃酮含量較高，并有較強的抗氧化活性。與南方堿蓬同一屬的鹽地堿蓬主要分布在我國各地沿海的灘涂沙地、資源豐富，其葉可食用與飼用，近年來由于沿海灘涂養殖的發展，常被視為雜草以閑置或根除。探討該植物體內黃酮類化合物的含量及提取工藝，將為其藥用開發與食品保健利用提供科學依據。?

近年來有關南方堿蓬中黃酮的提取及含量測定的研究有較多的報道，目前多采用顯色法測定：以蘆丁為對照品，通過與亞硝酸鈉、硝酸鋁和氫氧化鈉顯色后，采用分光光度法，在510nm處測定總黃酮含量，但在實際測定中發現顯色法穩定性差，雜質干擾也會導致測定含量偏高。在紫外光波長范圍內，利用高效液相色譜法測定鹽地堿蓬中黃酮含量的方法研究甚少，可以有效地提高含量測定方法的準確性、靈敏度、重現性和線性范圍。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種鹽地堿蓬黃酮提取及含量測定方法。?

本發明所采用的技術方案：?

1)采集海濱植物鹽地堿蓬，選取莖、葉，晾干、粉碎；?

2)鹽地堿蓬(重量)與溶劑(體積)之比為1∶20～1∶30，浸泡30min，于微波爐中處理10min，趁熱抽濾，收集提取液；?

3)提取液中加入與乙醇提取液體積比為1∶1的石油醚，萃取3～4次，脫去脂溶性?雜質，得乙醇溶液層；?

4)將乙醇溶液層轉入大孔吸附樹脂柱，原液與樹脂量的比為1∶2，依次用水、80％乙醇洗脫至溶液由淺黃色變為無色，收集乙醇溶液洗脫液；?

5)將洗脫液于50℃條件下減壓濃縮，得到鹽地堿蓬黃酮類化合物浸膏。?

6)所得鹽地堿蓬的黃酮提取浸膏用標準溶液溶解，配制成待測溶液；?

7)將對照品蘆丁烘干至恒重，加標準溶液溶解，配制成梯度的標準溶液，在360nm波長下，記錄蘆丁的出峰時間并測定該標準溶液的色譜峰面積，根據峰面積與濃度之間的對應關系建立標準曲線；?

8)將待測液在360nm波長下測色譜峰面積，由標準曲線查得該待測液濃度，該濃度指即為待測液總黃酮含量，根據稀釋倍數換算出鹽地堿蓬黃酮含量。?

本發明利用浸泡、微波輔助提取鹽地堿蓬中黃酮，本方法操作簡單，時間短，溶劑的利用率高，有利于提高黃酮的制取率和降低生產成本，使所開發工藝易于實現產業化。?

本發明針對鹽地堿蓬中的黃酮與對照品蘆丁均在360nm±1nm波長處對紫外光的有最大吸收(見圖1、2)，確定360nm作為鹽地堿蓬中黃酮的測定波長，鹽地堿蓬中的黃酮與對照品的出峰時間均為16.58min(見圖3、4)。根據待測溶液在此波長處的吸光度值由黃酮含量對比基準即可查得該溶液的黃酮含量。該方法的繪制的標準曲線線性相關系數γ＝0.9971(見附表1、圖5)，加樣回收實驗結果表明：回收率為99.65％，相對標準偏差為0.58％(見附表2)。因此利用本發明對鹽地堿蓬中的黃酮含量進行測定，測定結果準確性高，而且方法簡單，易于操作。?

本發明為鹽地堿蓬中黃酮的提取和分離提供了可行性依據，為進一步研究和利用鹽地堿蓬中的黃酮物質，提高鹽地堿蓬的利用價值奠定了基礎。?

附圖說明

圖1蘆丁對照品光譜掃描圖?

圖2鹽地堿蓬黃酮提取物光譜掃描圖?

圖3蘆丁對照品高效液相色譜圖?

圖4鹽地堿蓬黃酮提取物高效液相色譜圖?