[發(fā)明專利]一種高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法

無效

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• 申請日: 2011-10-14
• 公開（公告）號: CN102507757A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設計）人: 裴波;尹楊青
• 申請（專利權）人: 安徽皖儀科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產(chǎn)權代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

技術領域

本發(fā)明涉及一種色譜檢測方法，具體涉及一種高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法。

背景技術

高效液相色譜法是儀器分析領域被普遍使用的方法，它通過被分析物和色譜填料的各種相互作用關系實現(xiàn)分離并利用被分析物的物理或化學性質(zhì)實現(xiàn)高精度的定性定量分析。目前廣泛應用于化學、化工、高分子、生物、食品、醫(yī)藥等領域。

抗壞血酸是一種水溶性維生素，水果和蔬菜中含量豐富。在氧化還原代謝反應中起調(diào)節(jié)作用，缺乏它可引起壞血病。但是抗壞血酸在水產(chǎn)品中含量的研究較少，有文獻用滴定法對其含量做了初步的探究。本發(fā)明以條斑紫菜為研究對象，利用高效液相色譜法準確快速測定其中的抗壞血酸的含量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供了一種高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法，從而準確測定其含量，方法操作簡單、靈敏度高、重現(xiàn)性好。

為了實現(xiàn)上述目的本發(fā)明采用如下技術方案：

高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)條斑紫菜中抗壞血酸的制備提取：取新鮮的條斑紫菜若干，加入0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液，勻漿，0.20-0.24μm微孔濾膜過濾，待測；

(2)配制抗壞血酸的標準溶液，并制作標準曲線；

(3)高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量。

所述的高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法，其特征在于：所述的高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱：AQ-C18，250×4.6mm，5μm；流動相：0.01mol/L磷酸二氫鉀(pH2.5)-甲醇(95∶5，V/V)；檢測器波長為：265nm；流速為1ml/min，進樣體積為20μL，柱溫25℃。

本發(fā)明的有益效果：

方法簡單，檢測精確，尤其是所選色譜柱及流動相能實現(xiàn)樣品更好的分析效果。

附圖說明

圖1為抗壞血酸標準工作曲線。

圖2為抗壞血酸標準品色譜圖。

具體實施方式

實施例1：高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)條斑紫菜中抗壞血酸的制備提取：取新鮮的條斑紫菜若干，加入0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液，勻漿，0.20-0.24μm微孔濾膜過濾，待測；

(2)配制抗壞血酸的標準溶液，并制作標準曲線；

(3)高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量。

所述的高效液相色譜法測定條斑紫菜中抗壞血酸含量的方法，其特征在于：所述的高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱：AQ-C18，250×4.6mm，5μm；流動相：0.01mol/L磷酸二氫鉀(pH2.5)-甲醇(95∶5，V/V)；檢測器波長為：265nm；流速為1ml/min，進樣體積為20μL，柱溫25℃。

實施例2：本發(fā)明的具體實驗方案：

1儀器與試劑

1.1儀器：

皖儀LC3000B高效液相色譜儀，配備UV3000紫外檢測器和LCS3000Q液相色譜工作站；勻質(zhì)器。AQ-C18，250×4.6mm，5μm色譜柱。

1.2材料試劑：

抗壞血酸標準品(純度＞98％)；新鮮條斑紫菜(采自黃海海域)；甲醇(HPLC級)；超純水；磷酸二氫鉀(分析純)；0.22μm微孔濾膜。

流動相：配制0.01mol/L的磷酸二氫鉀溶液，并用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5，按照95∶5的體積比將上述溶液與甲醇混合，制成流動相。

抗壞血酸母液：稱取50mg的抗壞血酸，用0.01mol/L的磷酸二氫鉀溶液(pH2.5)溶解并定容至100ml容量瓶中，制成500μg/ml的母液，放于冰箱中備用。

2實驗步驟

2.1樣品制備：

取2g新鮮的條斑紫菜切碎，加0.01mol/L的磷酸二氫鉀溶液(pH2.5)適量，勻質(zhì)，最后定容至100ml容量瓶中，0.22μm微孔濾膜過濾，待測。

2.2定性試驗：

利用相對保留時間以及標準物質(zhì)添加法進行定性。比對標準溶液中標準品和樣品供試液在相同的色譜條件下的色譜圖和相對保留時間；在樣品中分別加入適量的標準物質(zhì)，比較不加標準物質(zhì)的色譜圖，變高的峰和標準品的位置是一致的。

2.3標準曲線制作