[發明專利]產黃青霉抗真菌蛋白Pc-Arctin及其制備方法

有效

• 申請號: 201110309044.9
• 申請日: 2011-10-13
• 公開（公告）號: CN102337223A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發明（設計）人: 陳新華;陳志騰;敖敬群
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C07K14/385;C12P21/02;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;C12R1/82
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及一種微生物源蛋白，尤其是涉及一種產黃青霉抗真菌蛋白Pc-Arctin及其制備方法。

背景技術

真菌在地球上的分布極為廣闊，種類亦十分豐富多樣。其中對人類和其他哺乳動物具有致病作用的真菌種類約有200多種，另加上一些可以引起過敏癥狀的真菌，影響人類健康的致病真菌約有300多種，煙曲霉、新型隱球菌及白色假絲酵母被認為是造成人類疾病的主要真菌。相對于細菌、病毒和原生動物引起的感染而言，真菌性感染疾病的病例要少的多，但是，真菌性疾病儼然已成為一個嚴重的國際性問題，許多病人因真菌感染沒有有效的藥物治療而死亡。

真菌不僅是人和其他動物致病的重要因素，也是農業生產上作物病害和食品污染的重要根源。污染了真菌的食品通常都會含有真菌毒素，是人類健康生活中的一個重要安全隱患。許多農作物在田間的時候就已經污染了真菌及其所產生的毒素，不僅直接造成田間作物生長不良，嚴重影響作物產量，而且收獲的糧食等也會因污染毒素而降低了產品品質，甚至威脅健康，造成巨大的經濟損失。化學農藥的長期使用對環境和農藥施用者的健康威脅較大，破壞農田生態系統，影響農業資源的可持續利用。

從自然環境中尋找新的抗真菌藥物用以解決嚴重危害農業生產的霉菌病成為了研究熱點。針對以前使用藥物或者化學試劑的局限性，對未來發展的新藥提出了一些新的要求：藥物在體內保持一定的穩定性，能夠廉價可持續生產，抗菌效果好且對人體無毒副作用。

曲霉科中的青霉和曲霉是目前發現的產抗真菌蛋白的兩個屬，也是絲狀真菌中僅有的兩個產抗真菌蛋白的兩個屬。曲霉屬中的巨大曲霉、黑曲霉和棒曲霉分別能夠產生AFP、AnAFP以及AcAFP等抗菌蛋白([2]Gun?Lee?D，Shin?SY，Maeng?CY，et?al.(1999).Isolation?and?characterization?of?a?novel?antifungal?peptide?from?Aspergillus?niger.Biochem.Biophys.Res.Commun.263：646-651；[5]Skouri-Gargouri?H，Gargouri?A(2008).First?isolation?of?a?novel?thermostable?antifungal?peptide?secreted?by?Aspergillus?clavatus.Peptides?29：1871-1877；[6]Wnendt?S，Ulbrich?N，Stahl?U(1994).Molecular?cloning，sequence?analysis?and?expression?of?the?gene?encoding?an?antifungal-protein?from?Aspergillus?giganteus.Current?Genetics?25：519-523.)，青霉屬中的產黃青霉、納地青霉能夠分泌PAF、NAF、PgAFP等抗真菌蛋白([1]Geisen?R(2000).P.nalgiovense?carries?a?gene?which?is?homologous?to?the?paf?gene?of?P.chrysogenum?which?codes?for?an?antifungal?peptide.International?Journal?of?Food?Microbiology?62：95-101；[3]Marx?F，HaasH，Reindl?M，et?al.(1995).Cloning，structural?organization?and?regulation?of?expression?of?the?Penicillium?chrysogenum?paf?gene?encoding?an?abundantly?secreted?protein?with?antifungal?activity.Gene?167：167-171；[4]Rodriguez-Mamn?A，Acosta?R，Liddell?S，et?al.(2010).Characterization?of?the?novel?antifungal?protein?PgAFP?and?the?encoding?gene?of?Penicillium?chrysogenum.Peptides?31：541-547.)。這一類真菌蛋白與來自其他生物具相同功能的蛋白在氨基酸序列上沒有很高的同源性，因此可能代表著一類新的抗真菌蛋白家族，但是它們與植物、無脊椎動物和兩棲類生物功能相似的蛋白具有一些共同的特征，它們都是一類小分子量(51～58個氨基酸，5.8～6.6kDa)、富含半胱氨酸殘基的抗真菌蛋白，由于分子內含有大量的賴氨酸和精氨酸等堿性氨基酸殘基而使整個分子呈現堿性。