[發明專利]利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法

有效

• 申請號: 201110308479.1
• 申請日: 2011-10-12
• 公開（公告）號: CN102329829A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 崔桂友;周娜;黃玉軍;冉昇
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06;C12R1/80
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.?利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，所述的方法是：

將具有大豆苷元C8羥基化酶活力的微生物菌種接種到培養液中，進行搖瓶發酵培養；發酵中期，向發酵液中加入含有大豆苷元的轉化液，使大豆苷元轉化為8-羥基大豆苷元；轉化結束后，去除菌絲體，上清液用有機溶劑萃取，萃取液經濃縮后，經過重結晶，可得到的轉化產物晶體；或者萃取液經濃縮后，經硅膠層析分離、Sephadex純化或再經HPLC制備，可得到含有該轉化產物的溶液，再將該溶液經濃縮、或結晶、或低溫干燥處理后，可得到的轉化產物晶體或粉末。

2.?根據權利要求1所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述的具有大豆苷元C8羥基化酶活力的微生物菌種是青霉屬（Penicillium?spp.）真菌，或者是任何可使大豆苷元C8位羥基化的微生物或混合微生物。

3.?根據權利要求2所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述的青霉屬（Penicillium?spp.）真菌是皮殼青霉（Penicillium?crustosum?）CGMCC3.7142、）、橘青霉（Penicillium?citrinum,）CGMCC3.6933、圓弧青霉（Penicillium?cyclopium?var.?albus）?CGMCC3.4041、島青霉（Penicillium?islandicum,）CGMCC3.7171）、點青霉（Penicillium?notatum,）CGMCC?3.6932）、皺褶青霉（Penicillium?rugulosum,）CGMCC3.1067）、純綠青霉（Penicillium?viridicatum）?CGMCC3.7170。

4.?根據權利要求1所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述的用于發酵培養的培養液，是真菌發酵培養液或其他任何適合青霉屬真菌或其他能使大豆苷元C8羥基化的微生物的營養介質。

5.?根據權利要求1所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述的向發酵液中加入含有大豆苷元的轉化液中，該底物大豆苷元溶液，是在有機相中配制；有機相為二甲基亞砜或甲醇。

6.?根據權利要求1所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述轉化發酵反應條件為：轉化溫度范圍在28~30℃，160~180?r/min搖瓶振蕩通氣、或攪拌通氣或管道通氣供氧，反應時間96~120小時，轉化結束后，將轉化液與菌絲體過濾或離心分開，可獲得含有8-羥基大豆苷元的轉化液。

7.?根據權利要求6所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述發酵轉化液與菌絲體分離，采用過濾分離或離心分離的方法；上清液用有機溶劑萃取。

8.?根據權利要求7所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述的萃取含有8-羥基大豆苷元的轉化液的有機溶劑為乙酸乙酯，或任何其他可萃取產物的有機溶劑。

9.?根據權利要求8所述的利用青霉菌轉化大豆苷元為8-羥基大豆苷元的方法，其特征在于所述的萃取液，經濃縮后，經過重結晶，可得到的轉化產物晶體；或者萃取液經濃縮后，經硅膠層析分離，或Sephadex純化，或再經HPLC制備，可得到含8-羥基大豆苷元的溶液，再將含8-羥基大豆苷元的溶液經濃縮、或低溫干燥處理后，可得到的8-羥基大豆苷元粉末或晶體。