[發明專利]防治溫室大棚黃瓜霜霉病的生防菌株BS1及其應用

無效

• 申請號: 201110308125.7
• 申請日: 2011-10-12
• 公開（公告）號: CN102329758A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 羅玉明;鄭麗;李師默;楊威
• 申請（專利權）人: 淮陰師范學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/085
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

1.一種防治溫室大棚黃瓜霜霉病的生防菌株BS1，為蠟質芽孢桿菌(Bacillus?cereus)，于2011年4月2日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCCNO.4736。

2.權利要求1所述的保藏號為CGMCC?NO.4736的蠟質芽孢桿菌BS1在制備防治溫室大棚黃瓜霜霉病的藥物中的應用。

3.一種防治溫室大棚黃瓜霜霉病的生防菌劑，其特征在于以權利要求1所述的保藏號為CGMCCNO.4736的蠟質芽孢桿菌BS1為有效成分，其中蠟質芽孢桿菌BS1的活菌濃度為1×10⁹～10¹⁰CFU/ml。

4.權利要求3所述的防治溫室大棚黃瓜霜霉病的生防菌劑的制備方法，其特征在于包含如下步驟：

1)BS1種子菌液的培養：將權利要求1所述的菌株BS1接種到LB培養液中32℃200rpm振蕩培養18-24h，12～16小時后定期取樣測600nm處的OD值，測定過程中以未接菌的培養液來調零，直到種子菌液OD值均在0.5～0.8之間時結束培養，獲得種子菌液；

2)菌劑制備：將種子菌液以1∶100體積比加入裝有發酵培養液的發酵罐中，30℃250rpm振蕩培養20～24小時，發酵液pH值維持在7.0，溶氧量20％，通氣量5～7m³/小時，罐壓0.05～0.1KPa，然后4000rpm離心10min，每1000ml培養液獲得12～15g濕菌，取濕菌與菌體保藏液按1g∶40ml配成以菌株BS1為有效成分的生防菌劑，活菌濃度為1×10⁹～10¹⁰CFU/ml。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于所述的發酵培養液配方為：麥芽糖1.2g/L，玉米粉2.4g/L，黃豆粉2.4g/L，蛋白胨3.2g/L，二水氯化鈣0.12g/L，一水硫酸錳0.12g/L，磷酸氫二鉀0.18g/L，調節pH值為7.2～7.4；

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于所述的菌體保藏液的制備方法為：pH6.8，0.03mol/L的磷酸鹽緩沖液中加入Tween20至Tween20在緩沖液中的終濃度為0.02mol/L即得菌體保藏液。