[發明專利]以海水白點蟲制動抗原互補脫氧核糖核酸生產的疫苗及其制造方法及用途

有效

• 申請號: 201110307735.5
• 申請日: 2011-10-12
• 公開（公告）號: CN102732533A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 宋延齡;林彥宏;卜莉亞
• 申請（專利權）人: 宋延齡
• 主分類號: C12N15/30
• 分類號: C12N15/30;C12N15/10;C12N15/63;C12N15/70;C12N15/85;A61K48/00;A61K39/002;A61P33/02;C07K16/20;C12R1/19
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫

1.一種優化海水白點蟲制動抗原互補脫氧核糖核酸序列的方法，其包含：

a.取得海水白點蟲制動抗原的mRNA序列；

b.將該mRNA序列轉換為cDNA序列；

c.根據該cDNA序列中終止碼周圍的密碼子對應的氨基酸殘基的特定特征推測出終止碼特定氨基酸，使該終止碼以能轉譯出該特定氨基酸的密碼子取代后，轉譯出的蛋白與從該海水白點蟲纖毛幼蟲純化出的制動抗原彼此的免疫原性相近；及

d.將該終止碼以能轉譯出該特定氨基酸的密碼子取代，產生優化的cDNA序列；

其中該特定特征是選自終止碼周圍密碼子所對應的氨基酸殘基的結構特性、疏水性、電荷分布所組成的群組。

2.如權利要求1所述的方法，該特定氨基酸為精氨酸、甘胺酸或丙胺酸。

3.一優化的海水白點蟲制動抗原互補脫氧核糖核酸序列，其包含SEQ?ID?NO：10所示的核苷酸序列。

4.一載體，其包含如權利要求3所述的優化的海水白點蟲制動抗原cDNA序列。

5.如權利要求4所述的載體，其為pGex2T-iAg或pcDNA3.1-iAg。

6.一種核酸疫苗，其包含如權利要求3所述的優化的海水白點蟲制動抗原cDNA序列。

7.如權利要求6所述的核酸疫苗，其是以幾丁聚糖納米顆粒包裹。

8.一種優化的海水白點蟲制動抗原cDNA序列用于制備針對海水白點蟲的抗體的用途，其特征在于將包含SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列的cDNA序列的載體使用于一宿主，促使該宿主產生抗體對該cDNA序列轉譯出的蛋白質發生凝集反應后，取得該針對海水白點蟲的抗體。

9.如權利要求8所述的用途，其中該載體是以幾丁聚糖包裹成納米顆粒。

10.如權利要求8所述的用途，其中該載體為pGex2T-iAg或pcDNA3.1-iAg。

11.如權利要求8所述的用途，其中該宿主為水生生物。

12.如權利要求11所述的用途，其中該水生生物為魚類。

13.如權利要求12所述的用途，其中該魚類為黑鯛、異臂花鮨、紅點九刺鮨、青星九刺鮨、細點牙鯛、歐洲海鱸、尖吻重牙鯛、單斑重牙鯛、青石斑、點帶石斑、鞍帶石斑、三斑石斑、黑毛瓜子臘、臀斑髭鯛、棘箱鲀、大黃魚、尖吻鱸、銀紋笛鯛、赤鰭笛鯛、白星笛鯛、角鱗鲀、真鯛、花軟唇、茉莉花鳉、魔鬼蓑鲉、黃錫鯛、金錢魚、紅甘鲹、銀籃子魚、金頭鯛、布氏鯧鲹、海鱺、青甘鲹、克氏海葵魚、白條?？~、鞍斑?？~或眼斑?？~。

14.如權利要求8所述的用途，其中將該載體使用于該宿主的方式可為混入飼料或食餌中、混入水中浸泡該宿主或注射該宿主。