[發(fā)明專利]一種高純度苦樹素A的制備方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110304674.7
• 申請(qǐng)日: 2011-10-10
• 公開（公告）號(hào): CN102391257A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉東鋒;吳艷波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C07D407/06
• 分類號(hào): C07D407/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種高純度苦樹素A的制備方法。

背景技術(shù)

苦樹Picrasma?quassioides(D.Don)?Benn.為苦木科苦樹屬植物。苦樹屬是我國所有的苦木科植物5個(gè)屬中的一個(gè)，該屬植物為多年生落葉喬木，高達(dá)10余米，樹皮紫褐色，平滑，有灰色斑紋，全株有苦味，喜生長于濕潤而肥沃的山坡、山谷、林緣、溪邊和路旁等地。《中國植物志》記載，我國分布該屬植物有中國苦樹P.chinensisP.?Y.?Chen、光序苦樹(變種)P.quassioides(D.?Don)?Benn.?Var.?glabrescens?Pamp.、苦樹(原變種)P.quassioides(D.?Don)?Benn.?var.quassioides2個(gè)種和1個(gè)變種。

該屬植物苦樹是我國南方民間用藥，歷代本草均未見記載，《中國藥典》1977年版一部開始收載。其性寒，味苦，歸肺，大腸經(jīng)，有清熱燥濕、解毒、殺蟲之功效。臨床上多用于抗感染、降血壓等方面的治療。主要分布于我國黃河以南各省，以廣東廣西山區(qū)資源最為豐富。苦樹化學(xué)成分復(fù)雜，目前國內(nèi)外對(duì)其化學(xué)成分的報(bào)道有鐵屎米酮類生物堿、咔巴啉類生物堿、苦木苦味素、甘遂型三萜、酚苷、酚酸、苯丙素、二氫黃酮苷類化合物。其中苦樹素A具有特異地抑制35S-TBPS與大鼠腦膜的結(jié)合，其IC₅₀為0.18μM；苦樹素A還具有殺蟲活性，對(duì)蟑螂的LD₅₀為1.1μg/蟑螂。

目前尚未見采用高速逆流色譜法分離純化苦樹素A的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種苦樹素A的制備方法，采用高速逆流色譜法，可以快速高效得到高純度苦樹素A。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

1）以漿果苦樹莖皮為原料，粉碎，5-8倍量低碳醇超聲提取，提取液減壓濃縮至浸膏，再將硅膠氧化鋁混合均勻裝柱，將苦樹浸膏用氧化鋁拌樣，上硅膠氧化鋁混合柱，用混合溶液洗脫，硅膠薄層色譜監(jiān)測(cè)，收集洗脫液，減壓濃縮得濃縮液；

2）將正己烷、甲醇、水在分液漏斗中充分混合，靜置分層后，取下相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉(zhuǎn)主機(jī)，泵入上相做流動(dòng)相，平衡后，由進(jìn)樣閥注進(jìn)濃縮液，根據(jù)檢測(cè)器圖譜，收集組分，回收試劑，干燥即得高純度苦樹素A。

步驟1）中所述的低碳醇為70-90%的甲醇或乙醇溶液。

步驟1）中所述的超聲提取次數(shù)為2-3次，每次30-60min。

步驟1）中的硅膠氧化鋁柱層析：硅膠和氧化鋁的比例為5-10：1。

步驟1）所述混合溶液為85-65：2的氯仿-甲醇溶液或氯仿-丙酮中的一種。

步驟2）所述的正己烷、甲醇、水混合比例為4-6:3-8:3。

步驟2）所述的主機(jī)轉(zhuǎn)速700-1000rpm，流動(dòng)相流速1-3ml/min。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是工藝采用硅膠氧化鋁混合柱和高速逆流色譜聯(lián)合制備苦樹素A，生產(chǎn)制備量大、純度高、易操作、生產(chǎn)周期短、收率高。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合具體實(shí)施方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

硅膠薄層色譜法：

薄層板：硅膠GF254薄層板

展開劑：石油醚-丙酮(2:1)

顯色劑：香草醛乙醇濃硫酸。

實(shí)施例1：

取漿果苦樹莖皮粉碎，取10kg，投入超聲提取罐，加入5倍量90%的甲醇溶液超聲提取2次，每次60min，合并2次提取液減壓濃縮無醇，和硅膠、氧化鋁（5：1）混合均勻裝柱，將苦樹浸膏用其3倍量的氧化鋁拌樣，上硅膠氧化鋁混合柱，用85：2的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜監(jiān)測(cè)，收集洗脫液，濃縮干燥得干燥物；

取正己烷、甲醇、水，按4:3:3比例在分液漏斗中充分混合，靜置分層后，取下相做固定相，充滿逆流色譜儀柱，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速調(diào)整為700rpm，泵入上相做流動(dòng)相，平衡后，流速調(diào)整為3ml/min，由進(jìn)樣閥注進(jìn)濃縮液，根據(jù)檢測(cè)器圖譜，收集組分，回收試劑，干燥得苦樹素A805mg，經(jīng)檢測(cè)，含量98.2%。

實(shí)施例2：