[發明專利]一種制備洋艾素的方法

無效

• 申請號: 201110303897.1
• 申請日: 2011-10-10
• 公開（公告）號: CN102336731A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種制備洋艾素的方法，特別是涉及一種采用高速逆流色譜制備洋艾素的方法。

背景技術

洋艾素為黃酮類物質，分子式：C20H20O8，分子量：384，結構式：

臭靈丹草為菊科植物翼齒六凌菊全草，又叫鹿耳林、大黑藥，傳統醫學認為其具有清熱解毒、止咳祛痰作用。現有成藥靈丹草顆粒、片劑和合劑，用于風熱邪毒，咽喉腫痛，肺熱咳嗽；急性咽炎、扁桃體炎、上呼吸道感染等癥。現代研究發現，臭靈丹草中不僅含有萜類功能性成分，含有黃酮類功能性成分，其中洋艾素就是臭靈丹草中的功能性指標性成分，《藥典》2010版規定臭靈丹草中洋艾素含量不得低于0.1%。

通過文獻檢索，從臭靈丹草中提取洋艾素的方法公開甚少，尤其高純度的洋艾素制備方法。如文獻“臭靈丹菇類和黃酮化合物”采用的方法是水煎煮提取，硅膠柱色譜和重結晶等方法進行分離純化得到包括洋艾素在內的多種化合物。由于采用傳統的硅膠柱分離，分離過程溶劑體系選在復雜，梯度洗脫用量大，周期長，而且會分離過程中會產生死吸附現象，造成產品收率低，不適合洋艾素的制備。

　高速逆流色譜(high?speed?countercurrentchromatography，簡稱HSCCC)是一種液-液色譜分離技術，它的固定相和流動相都是液體，沒有不可逆吸附，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優點。由于HSCCC與傳統的柱層析分離純化方法相比具有明顯的優點，因此此項技術己被廣泛應用于中藥成分分離、保健食品、生物化學、生物工程、天然產物化學、有機合成、環境分析等領域。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的缺陷和不足，提供一種制備洋艾素的快速、高效方法。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：一種制備洋艾素的方法，其特征在于：取臭靈丹草粉碎，加入5-15倍量40-90%甲醇溶液超聲提取2-3次，提取液減壓濃縮至無醇放置沉淀，沉淀物濾出用飽和石灰石水溶解，除去不溶物，再調節中性，過濾，濾出物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測器檢測，收集目標成分，濃縮結晶，干燥得洋艾素。

所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統可選三元溶劑體系，優選氯仿、甲醇、水，比例為4-10:3-7:2-5，上相為流動相，下相為固定相。

所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統可選四元溶劑體系，優選石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，比例為1-10:2-10:2-9:1-9，下相為流動相，上相為固定相。

所述的高速逆流色譜分離時主機轉速可為700-1000rpm，流動相流速為1-4ml/min。

本發明的優勢是：采用了超臨界CO2梯度萃取，先萃取小分子非極性物質，再通入加夾帶劑萃取有效成分，所得粗提物含量高，萃取過程中能耗低、無污染、效率高，而且整個工藝操作簡單，易于實現工業化生產。

具體實施方式

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明。

實施例1：

臭靈丹草粉碎，取2kg，加入10倍量90%甲醇溶液超聲提取2次，每次超聲30分鐘，提取液減壓濃縮至無醇放置沉淀，沉淀物濾出，加入200ml飽和石灰石水充分攪拌溶解，除去不溶物，再用稀鹽酸調節中性，過濾，得8g粗提物。取氯仿、甲醇、水按3:2:1比例混合，充分分層，取下相注滿高速逆流色譜柱，開轉主機800rpm，同時泵入上相做流動相，動態平衡后，流速調整3ml/min，流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器檢測，收集目標成分，連續制備，合并流分濃縮結晶，真空干燥得洋艾素1.3g，經HPLC檢測，含量98.4%。

實施例2：

臭靈丹草粉碎，取2kg，加入5倍量80%甲醇溶液超聲提取3次，每次超聲50分鐘，提取液減壓濃縮至無醇放置沉淀，沉淀物濾出，加入300ml飽和石灰石水充分攪拌溶解，除去不溶物，再用稀硫酸調節中性，過濾，得10g粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按2:2:1:1比例混合，充分分層，取上相注滿高速逆流色譜柱，開轉主機900rpm，同時泵入下相做流動相，動態平衡后，流速調整2ml/min，流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器檢測，收集目標成分，連續制備，合并流分濃縮結晶，真空干燥得洋艾素1.1g，經HPLC檢測，含量98.8%。

實施例3：

臭靈丹草粉碎，取2kg，加入8倍量40%甲醇溶液超聲提取2次，每次超聲60分鐘，提取液減壓濃縮至無醇放置沉淀，沉淀物濾出，加入200ml飽和石灰石水充分攪拌溶解，除去不溶物，再用稀鹽酸調節中性，過濾，得14g粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按3:4:2:1比例混合，充分分層，取上相注滿高速逆流色譜柱，開轉主機700rpm，同時泵入下相做流動相，動態平衡后，流速調整4ml/min，流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器檢測，收集目標成分，連續制備，合并流分濃縮結晶，真空干燥得洋艾素1.4g，經HPLC檢測，含量97.5%。