[發明專利]青蝦KSPI基因、其擴增方法及擴增引物組

無效

• 申請號: 201110303774.8
• 申請日: 2011-10-10
• 公開（公告）號: CN102367440A
• 公開（公告）日: 2012-03-07
• 發明（設計）人: 傅洪拓;張響;喬慧;蔣速飛
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院淡水漁業研究中心
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/11;C12N15/10
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

1.青蝦KSPI基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。

2.用于擴增青蝦KSPI基因的引物組，其特征在于，其由如下引物組成：

引物組：

正向外引物3?KSPI?1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；

正向內引物3?KSPI?2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示；

反向外引物5?KSPI?1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4所示；

反向內引物5?KSPI?2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5所示。

3.一種擴增青蝦KSPI基因的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：獲得青蝦腦組織總RNA；

步驟2：合成cDNA；

步驟3：從本實驗室構建的青蝦精巢cDNA文庫中篩選到KSPI基因片段，以此作為中間序列；

步驟4：用引物組擴增獲得青蝦KSPI基因片段的3’端和5’端片段；所述引物組由如下引物組成：

正向外引物3?KSPI?1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；

正向內引物3?KSPI?2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示；

反向外引物5?KSPI?1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4所示；

反向內引物5?KSPI?2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5所示；

步驟5：將所述KSPI基因cDNA序列的中間片段、所述KSPI基因的3’端和5’端片段拼接，即得。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟4所述擴增為套式兩輪PCR。