[發明專利]近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測引物和試劑盒及檢測方法

無效

• 申請號: 201110303598.8
• 申請日: 2011-10-09
• 公開（公告）號: CN102312010A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發明（設計）人: 沈定霞;王凱飛;劉朝軍;葉麗艷;郭玲;張有江
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357
• 代理人: 趙慧

1.近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測引物，包括一對內引物和一對外引物，其特征在于，所述的一對內引物的序列如SEQ?ID?NO?1和SEQ?ID?NO?2所示，所述的一對外引物的序列如SEQ?ID?NO?3和SEQ?ID?NO?4所示。

2.近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒含有權利要求1所述的近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測引物以及環介導等溫擴增反應試劑。

3.近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測方法，其特征在于，對待檢測樣品經過培養后提取DNA，得DNA模板，利用權利要求1所述的近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測引物進行環介導等溫擴增，然后進行判讀。

4.根據權利要求3所述的近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測方法，其特征在于，環介導等溫擴增的反應體系中的混合引物由各自濃度均為10μM的SEQ?ID?NO?1～4各序列按8∶8∶1∶1的比例配制而成。

5.根據權利要求3所述的近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測方法，其特征在于，在20μl的環介導等溫擴增的反應體系中含如下成分：20mM?pH8.8的Tris-HCl，10mM?KCL，10mM(NH₄)₂SO₄，2mM?MgSO₄，0.1％Triton?X-100，3.6μl混合引物，8U?bstDNA聚合酶，1.5μlDNA模板，1.2mM?dNTP，0.8M甜菜堿，加H₂O至20μl。

6.根據權利要求3所述的近平滑念珠菌環介導等溫擴增的快速檢測方法，其特征在于，通過濁度、SYBR?green?I熒光反應的顏色或瓊脂糖凝膠電泳的條帶形狀進行判讀。