[發明專利]羽狀哈氏豆酸的高效分離純化方法

無效

• 申請號: 201110303459.5
• 申請日: 2011-10-10
• 公開（公告）號: CN102503917A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 劉東鋒;郭琴
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D307/54
• 分類號: C07D307/54
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥有效成分提取技術領域，涉及一種羽狀哈氏豆酸的高效分離純化方法。

背景技術

羽狀哈氏豆酸（Hardwickiic?acid）為二萜類化合物，分子式C₂₀H₂₈O₃，分子量316.44，為白色結晶，mp.103-104℃，廣泛分布于菊科、大戟科、唇形科、豆科、馬鞭草科等多種植物中，原料豐富，其中唇形科雷格拉鼠尾草Salvia?regal?Cav.的地上部分含量較高，收率達1.33%。

現代研究表明羽狀哈氏豆酸具有殺蟲、殺菌、抗真菌等活性，對雌性成蟲（豆蚜蟲）在劑量為5ppm/insect時，24小時候死亡率為62%，對枯草桿菌、金黃色葡萄球菌和恥垢分枝桿菌呈抗菌活性，對白色念珠菌、須發癬菌和長蠕孢菌呈抗真菌活性。

現有技術中，尚未檢索到適用于高純度羽狀哈氏豆酸規模化生產的制備方法報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種羽狀哈氏豆酸的高效分離純化方法。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

（1）以富含羽狀哈氏豆酸的藥材為原料，用乙醇熱回流提取，提取液濃縮；

（2）將濃縮液用石油醚萃取，取下層水相；

（3）將萃取后的水相再用乙酸乙酯萃取，得到萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯萃取物；

（4）將萃取物采用高速逆流色譜法分離純化，收集目標組分減壓濃縮，冷凍干燥，得到羽狀哈氏豆酸。

所述步驟（1）中富含羽狀哈氏豆酸的藥材為雷格拉鼠尾草或香巴豆。

所述步驟（4）中高速逆流色譜溶劑系統為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其體積比為（11-13）：（20-35）：（22-28）：（4-10）。

本發明的有益效果是：采用高速逆流色譜法分離純化，生產周期短、分離效果好、產品含量高。

具體實施方式

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

取雷格拉鼠尾草地上部分1kg粉碎，用80%乙醇4L加熱回流提取2次，提取液合并后減壓濃縮，所得粗浸膏混懸于水中，以石油醚反復萃取3次，取下層水相，將萃取后的水相用乙酸乙酯反復萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按體積比13:27:22:10在分液漏斗中混合充分，分層后取下相作為流動相，上相為固定相，將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至900r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至2.5ml/min，將乙酸乙酯萃取物溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮、冷凍干燥流分，制得羽狀哈氏豆酸7.89g，含量98.3%。

實施例2：

取雷格拉鼠尾草地上部分1kg粉碎，用75%乙醇5L加熱回流提取3次，提取液合并后減壓濃縮，所得粗浸膏混懸于水中，以石油醚反復萃取3次，取下層水相，將萃取后的水相用乙酸乙酯反復萃取6次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按體積比11:20:25:6在分液漏斗中混合充分，分層后取下相作為流動相，上相為固定相，將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至800r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至2ml/min，將乙酸乙酯萃取物溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮、冷凍干燥流分，制得羽狀哈氏豆酸8.23g，含量98.6%。

實施例3：

取香巴豆根1kg粉碎，用90%乙醇8L加熱回流提取2次，提取液合并后減壓濃縮，所得粗浸膏混懸于水中，以石油醚反復萃取4次，取下層水相，將萃取后的水相用乙酸乙酯反復萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按體積比12:33:28:9在分液漏斗中混合充分，分層后取下相作為流動相，上相為固定相，將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至820r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至3ml/min，將乙酸乙酯萃取物溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮、冷凍干燥流分，制得羽狀哈氏豆酸5.39?g，含量98.2%。

實施例4：

取香巴豆根1kg粉碎，用70%乙醇6L加熱回流提取3次，提取液合并后減壓濃縮，所得粗浸膏混懸于水中，以石油醚反復萃取3次，取下層水相，將萃取后的水相用乙酸乙酯反復萃取4次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按體積比13:35:24:4在分液漏斗中混合充分，分層后取下相作為流動相，上相為固定相，將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至850r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至2ml/min，將乙酸乙酯萃取物溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮、冷凍干燥流分，制得羽狀哈氏豆酸4.88g，含量98.8%。