[發明專利]雙子葉植株轉基因受體的快速制備方法

有效

• 申請號: 201110303049.0
• 申請日: 2011-10-10
• 公開（公告）號: CN102321666A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 壽惠霞;唐桂香;周練;馬林;宋張悅;楊曉鳳;周正劍
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N15/84
• 分類號: C12N15/84;A01H5/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.雙子葉植株轉基因受體的快速制備方法，其特征是包括以下步驟：

1)、雙子葉植株種子的表面消毒：

將雙子葉植株種子單層置于培養皿中，將上述裝有雙子葉植株種子的培養皿開蓋放入干燥器內，在干燥器內加入質量濃度為5～6％的次氯酸鈉溶液，然后再加入11～13mol/L的HCl溶液，所述次氯酸鈉溶液與HCl溶液的體積比為100∶3～4；

密封干燥器后，于室溫下滅菌10～16小時；

滅菌完成后，先將培養皿加蓋，然后從干燥器內轉移到無菌超凈臺上，打開培養皿的蓋子以除去培養皿內的殘留氯氣；得滅菌后雙子葉植株種子；

2)、雙子葉植株種子的吸脹：

將所述滅菌后雙子葉植株種子放入滅菌后的分化罐中，并加入無菌水，所述滅菌后雙子葉植株種子在黑暗下于18～22℃浸泡12～15小時；得吸脹后雙子葉植株種子；

3)、受體的制備：

將所述吸脹后雙子葉植株種子置于無菌吸水紙中，沿著種臍縱向切割從而將子葉分開兩瓣，去除種皮，得雙子葉植株轉基因受體。

2.根據權利要求1所述的雙子葉植株轉基因受體的快速制備方法，其特征是：所述雙子葉植株為大豆或豇豆。

3.根據權利要求2所述的雙子葉植株轉基因受體的快速制備方法，其特征是：所述步驟1)中：每個培養皿中放置120～170顆大豆種子，每個干燥器內放置3～4個所述裝有大豆種子的培養皿；在干燥器內加入100ml質量濃度為5～6％的次氯酸鈉溶液和3～4ml的摩爾濃度為11～13mol/L的HCl溶液。

4.根據權利要求3所述的雙子葉植株轉基因受體的快速制備方法，其特征是：所述步驟1)中：打開培養皿的蓋子以除去培養皿內的殘留氯氣的時間為25～40分鐘。