[發明專利]一種復方氨基酸中間體總氨基酸含量測定方法

有效

• 申請號: 201110302211.7
• 申請日: 2011-09-28
• 公開（公告）號: CN102507852A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 劉先言
• 申請（專利權）人: 八峰藥化宜昌有限責任公司
• 主分類號: G01N31/16
• 分類號: G01N31/16
• 代理公司: 宜昌市三峽專利事務所 42103
• 代理人: 成鋼

技術領域

本發明涉及一種復方氨基酸中間體總氨基酸含量測定方法。

背景技術

現有氨基酸含量檢測均采用專門的氨基酸分析儀或高效液相色譜儀，先對復方氨基酸溶液進行適當處理，在適宜的溫度及PH值條件下，經過適宜的色譜柱在一定比例的流動相帶動下，經梯度洗脫分離，再用專門的檢測器檢測峰面積。另取相應的氨基酸對照品制成相應濃度的對照品溶液，同法測定，用外標法按峰面積比計算各種氨基酸的含量(也可采用內標法進行分離檢測)。

此方法作為法定檢測通用方法，可檢測出每一種具體氨基酸的含量，一般用于成品出廠前的檢驗和法定檢驗，但不適用于氨基酸輸液的中間體控制用，因為此方法有以下缺點：

1)、操作復雜，檢測周期長，從取樣到單次檢測出結果2小時以上，有的品種還需要多次分離檢測，檢測時間也延長了生產時間，對于無菌制劑來說，可能因生產時間長而導致微生物大量繁殖，不利于氨基酸輸液藥品生產及質量控制；

2)、檢測所需的對照品及其它化學試劑價格昂貴，檢測成本高；

3)、系統誤差較大，檢測精度不高，對生產中的含量控制沒有指導價值。

發明內容

本發明針對復方氨基酸輸液配料過程中間體含量控制，提供一種復方氨基酸中間體總氨基酸含量測定方法，利用藥品中的每種氨基酸均有“α-氨基”這一共性，通過選擇性化學反應后進行中和滴定，再根據中和劑的消耗量計算氨基酸含量。

本發明的上述目的是通過這樣的技術方案來實現的：一種復方氨基酸中間體總氨基酸含量測定方法，由以下步驟組成：

步驟一：取復方氨基酸注射液樣品nml，加水25ml，混合均勻；

步驟二：用濃度為0.1mol/L的氫氧化鈉或0.1mol/L的鹽酸溶液調整步驟一完成后的混合溶液pH值到7.0；

步驟三：在步驟二完成后的混合液中加入預先調制的pH值為9.0的甲醛溶液10ml；

步驟四：再用濃度為0.1mol/L的氫氧化鈉滴定液將步驟三完成后的混合液滴定至PH＝9.0，記錄滴定液消耗的體積；

步驟五：步驟四所消耗的氫氧化鈉滴定液的體積即為α-氨基氮所消耗的體積，每1ml濃度為0.1mol/L的氫氧化鈉滴定液相當于1.401mg的α-氨基氮，再根據α-氨基氮推算出氨基酸總含量，計算公式如下：

其中：F—氫氧化鈉滴定液的實際摩爾濃度與標準摩爾濃度比，

V—消耗氧化鈉滴定液的體積(ml)，

a—復方氨基酸注射液處方中的標準α-氨基氮含量(mg/ml)，

n—取樣量(ml)。

所述復方氨基酸注射液樣品nml，1≤n≤3，n取整數。

步驟三中所述甲醛溶液的濃度為：37.0％-40.0％單位：g/ml。

本發明一種復方氨基酸中間體總氨基酸含量測定方法的有益效果如下：

1、操作簡單，檢測速度快，一般從取樣到檢測完畢只需10分鐘左右；

2、所有的試劑均為常用試劑，價格低廉，檢測成本低；

3、本方法適用范圍廣，所有復方氨基酸輸液都可采用；

4、檢測精度相對較高，對生產過程有很強的指導作用。

5、終點的判斷還可用指標劑法替代。

具體實施方式

工作原理：氨基酸為兩性物質，含—NH2(堿性)和—COOH(酸性)，當甲醛在堿性(PH＝9)環境下與氨基酸混合時，選擇性地與其中α位上的—NH2發生親核加成反應而顯現出酸性，然后用氫氧化鈉與—COOH發生酸堿中和反應，通過反應物消耗的當量數來計算氨基酸含量。

實施例1：

復方氨基酸注射液3AA中間體總氨基酸含量測定法：

精密量取本品3ml，加水25ml混勻，用濃度為0.1mol/L的氫氧化鈉或0.1mol/L的鹽酸溶液調整pH值到7.0，然后加預先調整pH值為9.0的甲醛溶液10ml，再用0.1mol/L的氫氧化鈉滴定液滴定至pH值到9.0即得。此次消耗氫氧化鈉滴定液的體積(ml)即為α-氨基氮所消耗的體積。總氨基酸含量計算公式為：

F—氫氧化鈉滴定液的實際摩爾濃度與標準摩爾濃度比，

V—消耗氧化鈉滴定液的體積(單位：ml)，

公式中4.711為復方氨基酸注射液3AA標準規定的α-氨基氮含量(單位：mg/ml)，

公式中3為復方氨基酸注射液3AA的取樣量(單位：ml)。