[發明專利]一種從紅花釣鐘柳中分離制備毛蕊花糖苷的方法

無效

• 申請號: 201110300550.1
• 申請日: 2011-10-09
• 公開（公告）號: CN102351919A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發明（設計）人: 謝峻;白林山;周安娜
• 申請（專利權）人: 安徽工業大學
• 主分類號: C07H15/18
• 分類號: C07H15/18;C07H1/08
• 代理公司: 馬鞍山市金橋專利代理有限公司 34111
• 代理人: 周宗如

技術領域

本發明屬于藥物資源領域，特別是涉及利用一種高速逆流色譜快速簡便地從紅花釣鐘柳中分離制備高純度毛蕊花糖苷的方法。

背景技術

毛蕊花糖苷，又名麥角甾苷、阿克苷，英文名：Verbascoside、Acteoside、Kusaginin，分子式C₂₉H₃₆O₁₅，?分子量?624.59。結構式：

毛蕊花糖苷和松果菊苷具有抗氧化、抗衰老、治療慢性腎小球腎炎等多種功能，主要來源于我國傳統中藥肉蓯蓉，且是中國藥典評價其質量的主要指標。肉蓯蓉和其寄主藜科植物梭梭在我國主要分布于新疆、內蒙古和甘肅的荒漠和戈壁一帶，近年來，國內外市場對該藥用植物資源需求的日益擴大，其商業價值不斷增長，在經濟利益的驅動下，人們無控制地大量挖掘，破壞了當地荒漠草原植被，造成沙區生態環境的嚴重惡化。目前，我國野生肉蓯蓉資源枯竭，其也被列為國家二級保護植物，收入《國際野生植物保護目錄》，同時被列入瀕臨絕種野生動植物種國際貿易公約附錄二。肉蓯蓉人工栽培不僅受地域限制，且技術難度高、周期長、見效慢，尋找富含毛蕊花糖苷替代資源迫在眉睫。

紅花釣鐘柳原產中美洲一帶，為多年生草本花卉，因耐寒耐旱、花期長、花色鮮艷而被作為觀賞植物廣泛引種于我國許多地區。此前已有文獻報道紅花釣鐘柳中富含松果菊苷。

目前，毛蕊花糖苷的分離多采用柱層析法，但操作起來十分繁瑣，且分離效率不高，很難得到高純度的樣品。高速逆流色譜是一種液液色譜，無固體相，它的分離原理是利用樣品在兩種互不相溶固定相和流動相的溶劑中分配比不同而進行分離的。和傳統的液固色譜比較，該色譜法具有幾個突出的優點：消除了傳統液固色譜中，固相載體的不可逆轉吸附導致的峰拖尾，樣品損失，污染或失活；成本低廉，和高效液相色譜比起來，高速逆流色譜儀器較為便宜，無須昂貴的固定相載體柱，流動相無須色譜純，使用分析純即可；高回收率，高效率，由于流動相和固定相均為液體，樣品可全部回收，且易于規模化生產；操作簡便。如今，高速逆流色譜逐漸被用于天然產物化學成分的分析和制備分離。所涉及的天然產物包括黃酮類、糖類、皂苷類、生物堿類、葸醌類、多酚類、香豆素類、多肽，以及蛋白質、多糖、抗生素等生物大分子物質和稀有元素、重金屬元素等無機物。

發明內容

本發明提供了一種利用高速逆流色譜法從紅花釣鐘柳中分離制備高純度毛蕊花糖苷的方法。

實現本發明的技術方案包括以下步驟：（1）將紅花釣鐘柳原料洗凈曬干，粉碎過篩；（2）以醇類溶劑為溶媒進行超聲波提取；（3）上述提取液經濃縮后，經大孔吸附樹脂分離，之后合并含毛蕊花糖苷的洗脫液組分；（4）將上述洗脫液組分濃縮干燥后，利用高速逆流色譜進行分離；（5）根據高效液相色譜分析檢測結果，收集合并相同組分，濃縮干燥后，得到產物毛蕊花糖苷。

所述作為超聲波提取溶媒的醇類溶劑為體積比30%～70%的甲醇、乙醇和正丁醇溶液中的任一種。

所述的大孔吸附樹脂為D101、AB-8、ADS-7、HZ806中的任一種。

所述高速逆流色譜為半制備型。

所述的利用半制備型高速逆流色譜進行分離，是指以正丁醇—乙酸乙酯—乙醇—水為組成的溶劑系統，其體積比為4～5︰0～1︰0～1︰4～5，參數為正轉轉速800?r/min，流動相流速2?ml/min，檢測波長280?nm，溫度25℃。

所述的HPLC色譜條件為：Phenomenex?C₁₈-ODS色譜柱?(150?mm?×?4.6?mm,?5?μm)，流動相A︰B（22︰78，v/v），其中流動相A為甲醇︰乙腈（3︰2，v/v），流動相B為0.1%的磷酸水溶液，流速1.0?ml/min，檢測波長330?nm，柱溫30℃，進樣量20?μl。

化合物的鑒定：應用Perkin-Elmer?Spectrum?One?NTS紅外光譜儀和Varian?INOVA-600核磁共振波譜儀分別進行IR，¹H-NMR和¹³C-NMR譜的鑒定。

本發明優點如下：首先，來源紅花釣鐘柳富含毛蕊花糖苷，資源豐富，簡單易得；其次，以大孔吸附樹脂粗分毛蕊花糖苷，具有溶劑毒性低、制備量大，以半制備型高速逆流色譜制備，具有分離時間短、樣品無損失、回收率高、節約溶劑、產品純度高等特點。

附圖說明

圖1為實施例1從紅花釣鐘柳中分離毛蕊花糖苷的高速逆流色譜圖。

具體實施方式