[發明專利]一種經濟的應用大規模平行測序技術檢驗多目標多基因的方法

有效

• 申請號: 201110299517.1
• 申請日: 2011-09-30
• 公開（公告）號: CN102344961A
• 公開（公告）日: 2012-02-08
• 發明（設計）人: 侯青
• 申請（專利權）人: 康旭基因技術（北京）有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種應用大規模平行測序技術同時檢驗多目標相關基因突變的方法其特征在于所述方法包括以下步驟：

a.設計并制備捕獲目標區域的探針；

b.將多個待測DNA樣品分別連接到設計好的加了特異性標簽的接頭；

c.將經過步驟b所得的不同樣品的DNA片段混合然后使用設計好的通用引物進行擴增；

d.將處理好的待測DNA片段混合物和步驟a所得探針加入反應管中，DNA樣本與探針雜交，通過洗脫得到待測的目標片段；；

e.調節反應溫度激活DNA聚合酶，用一對通用引物對步驟d所得序列同時進行PCR擴增反應；

f.將步驟e所得PCR擴增反應產物通過大規?；蚱叫蟹治銎脚_進行測序。

g.根據標簽特征分別對不同來源的基因樣本比對進行數據分析。

2.根據權利要求1所述的探針可以是寡聚核糖核酸(RNA)，也可以是寡聚脫氧核糖核酸(DNA)，但是不僅限于RNA和DNA，可以包括修飾后的DNA或者RNA等。

3.權利要求2所述探針以疊瓦式設計，完整覆蓋全部待測基因序列。

4.根據權利要求2所述的探針可以是結合在磁珠上的，也可以結合在載玻片上，但不僅限于這介質。

5.根據權利要求1所述的特異性標簽序列其特征在于；標簽序列位于接頭的最內側，通過粘性末端與待測片段結合；接頭5’和3’端分別進行磷酸化和硫化修飾。

6.這種方法可以廣泛應用于多樣品的基因測序，適用于遺傳性疾病的診斷、食品衛生和公共衛生行業大批量檢測的需要。