[發(fā)明專(zhuān)利]一種肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)定量抗體芯片及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110297932.3
• 申請(qǐng)日: 2011-10-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102507938A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭坤;劉銀坤;康曉楠;高冬梅;孫淳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/577
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/577
• 代理公司: 上海申匯專(zhuān)利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)定量抗體芯片及試劑盒，屬于生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

肝癌是惡性程度極高，預(yù)后極差的惡性腫瘤。全世界半數(shù)左右的肝癌病人集中在中國(guó)，其致死率居我國(guó)所有腫瘤的第二位。肝癌是我國(guó)第二位癌癥死因，全球50％以上的原發(fā)性肝癌發(fā)生在我國(guó)。術(shù)后高轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率（5年復(fù)發(fā)率達(dá)70％，小肝癌也達(dá)50％）已成為進(jìn)一步提高遠(yuǎn)期療效的瓶頸，也是攻克肝癌的重要關(guān)鍵。

近年來(lái)隨著免疫學(xué)、分子生物學(xué)和生物化學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究深入、檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展和方法學(xué)的進(jìn)步，腫瘤標(biāo)志物逐步成為臨床診斷中可依賴的指標(biāo)。理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有下述特點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，檢測(cè)濃度水平與腫瘤大小及分期有關(guān)，能用于療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷。雖然目前所檢測(cè)的腫瘤標(biāo)志物均未達(dá)到具有100%的靈敏度和100%的特異性等理想的程度，但由于檢測(cè)和評(píng)價(jià)方法的不斷改進(jìn)，使腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用價(jià)值顯得越來(lái)越重要。然而，由于基于單個(gè)分子標(biāo)記物的癌癥診斷分類(lèi)模型，尚未表現(xiàn)出令人信服的敏感性和特異性，新的癌癥相關(guān)的組織或血清分子標(biāo)記物的篩選和鑒定、評(píng)估其診斷價(jià)值已經(jīng)成為腫瘤研究的重要領(lǐng)域之一。

過(guò)去10年我國(guó)已進(jìn)行了不少工作，在肝癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)方面已取得了一系列標(biāo)志性成果：建立了國(guó)際領(lǐng)先的人肝癌轉(zhuǎn)移裸鼠及細(xì)胞模型系統(tǒng)；發(fā)現(xiàn)了一批有潛在意義的轉(zhuǎn)移相關(guān)分子及治療靶標(biāo)；初步建立了肝癌轉(zhuǎn)移的分子預(yù)測(cè)模型。但尚無(wú)足夠特異、敏感的肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)體系可用于臨床轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)。采用多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)將是今后肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)的研究方向。

對(duì)基因組的研究有時(shí)并不能完全反映機(jī)體功能的變化，為了減少這種相對(duì)“誤差”，迫切需要一種快捷，有效的蛋白質(zhì)分析技術(shù)。蛋白質(zhì)芯片技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。蛋白芯片是按預(yù)先設(shè)計(jì)的方式將抗原或抗體固定在基片上，形成蛋白質(zhì)的微陣列，即蛋白質(zhì)芯片，帶有特殊標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子（抗體或抗原）與之特異性結(jié)合，通過(guò)對(duì)標(biāo)記物的檢測(cè)來(lái)實(shí)現(xiàn)抗原抗體的高通量互檢。該技術(shù)所需蛋白質(zhì)的量極少，檢測(cè)反應(yīng)相對(duì)較快，具有通量化，穩(wěn)定性較好，靈敏度較高，而且可進(jìn)行定量分析。因此，構(gòu)建多分子體系的定量抗體芯片不僅可以克服單分子標(biāo)記物敏感性、特異性低的弊端，而且可利用統(tǒng)計(jì)分析建立更加客觀使用的預(yù)測(cè)模型。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種具有較高準(zhǔn)確率的肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)定量抗體芯片及試劑盒。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)定量抗體芯片，包括基片和點(diǎn)樣在基片上的癌癥相關(guān)蛋白的特異性抗體、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，其特征在于，所述的癌癥相關(guān)蛋白為OPN（骨橋蛋白）、ICAM（細(xì)胞間黏附因子）、VEGF（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子）、MMP9（基質(zhì)金屬蛋白酶9）、IL-8（白介素-8）和E-Selectin（E-選擇素）。

優(yōu)選地，所述的OPN、ICAM、VEGF、MMP9、IL-8和E-Selectin的特異性抗體的點(diǎn)制濃度依次為0.5mg/ml、0.7mg/ml、1.0mg/ml、0.2mg/ml、0.5mg/ml及0.5mg/ml。

優(yōu)選地，所述的特異性抗體為鼠抗人單克隆抗體。

本發(fā)明還提供了一種肝癌轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)試劑盒，其特征在于，包含以O(shè)PN、ICAM、VEGF、MMP9、IL-8和E-Selectin為檢測(cè)對(duì)象的定量抗體芯片，含有OPN、ICAM、VEGF、MMP9、IL-8和E-Selectin的抗原標(biāo)準(zhǔn)品，OPN、ICAM、VEGF、MMP9、IL-8和E-Selectin的生物素化的單克隆檢測(cè)抗體。

本發(fā)明的原理如下：