[發(fā)明專利]一種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽乳白肽C1及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110297181.5
• 申請(qǐng)日: 2011-09-27
• 公開（公告）號(hào): CN102336810A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅明;方宏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 同濟(jì)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K7/06
• 分類號(hào): C07K7/06;A61K38/08;A61P9/12
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 吳林松

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥理學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種具有降壓效應(yīng)的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽乳白肽C1(LAP-C1)及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

高血壓是目前最常見的心血管疾病之一，控制高血壓的發(fā)展進(jìn)程，有助于降低心血管系統(tǒng)疾病的風(fēng)險(xiǎn)。在這一病因中，腎素-血管緊張素這一升壓酶系是高血壓發(fā)病的一個(gè)最重要因素。目前作用于這一環(huán)節(jié)的化學(xué)藥品很多，雖然療效不錯(cuò)，但均有不同程度的毒副作用。近年來天然食品蛋白來源的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽，因其無毒副作用有望成為控制高血壓病程的理想選擇而備受關(guān)注，正在成為防治高血壓的研究熱點(diǎn)。天然食品蛋白來源的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽大致來源于動(dòng)物蛋白、植物蛋白、微生物蛋白。有關(guān)這方面的文獻(xiàn)報(bào)道有很多，將其總結(jié)，并將文章發(fā)表在《peptides》2008；29(6)：1062-71上。但目前的研究多停留在發(fā)現(xiàn)與提取層面，工藝復(fù)雜，純度低，保存困難。根據(jù)文獻(xiàn)合成的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽乳白肽(氨基酸序列：Leu-Arg-Pro-Val-Ala-Ala)，源于乳鐵蛋白，是臺(tái)灣等人所作研究，并沒有在臺(tái)灣相關(guān)部門申報(bào)專利。將其與牛血清白蛋白偶聯(lián)，延緩降解，結(jié)果取得長(zhǎng)時(shí)間控制SHR大鼠血壓的效果，亦沒有申請(qǐng)專利，只是將相關(guān)文章在《Kidney?Blood?Press?Res》2011；34：358-364上發(fā)表了。根據(jù)目前已提取的ACE抑制肽，證明降血壓肽的抑制活性與其氨基酸種類和組成密切相關(guān)。有關(guān)ACE抑制劑活性與結(jié)構(gòu)的關(guān)系的研究認(rèn)為，維持其高活性所必需的結(jié)構(gòu)是C端Pro，Phe，Thy或序列中含有疏水性氨基酸；二肽的N端為芳香族氨基酸或C端為Tyr，Try，Pro抑制作用最強(qiáng)。抑制ACE活性的肽的特點(diǎn)是：①分子量相對(duì)較低，約含2～12個(gè)氨基酸殘基。如果從N端延長(zhǎng)某個(gè)二肽，相應(yīng)三肽的抑制活性通常增強(qiáng)，但如繼續(xù)延長(zhǎng)，活性則會(huì)降低；②C端含有苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸的三肽或二肽，活性比較高；③N端為疏水性支鏈氨基酸如纈氨酸和異亮氨酸，活性比較高，而N端為脯氨酸則活性降低；④C端殘基上存在賴氨酸或精氨酸，肽的抑制活性可以提高，賴氨酸或精氨酸側(cè)鏈上的胍或ε-氨基上的正電荷在其中起著重要作用，取代C端的精氨酸殘基會(huì)造成其類似物活性的基本喪失。因此，試圖通過改良血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽乳白肽的氨基酸序列來增加血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽乳白肽的活性。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的問題，本發(fā)明的目的是提供一種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1，該血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1具有降壓效應(yīng)。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供了一種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1，該血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C?1的氨基酸序列為L(zhǎng)eu-Arg-Pro-Val-Ala-Ala-Pro。

所述的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1物理性狀：白色粉末，水溶性好；分子量：722.89；純度＞95％。

所述的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1體外抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性IC50：18.06μM。

所述的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1用于治療和預(yù)防高血壓的藥物。

在既往研究的基礎(chǔ)上，根據(jù)參考文獻(xiàn)提出的添加Pro可以增強(qiáng)肽的降壓效應(yīng)的規(guī)則，將乳白肽改造為乳白肽C1，即在其c’端添加Pro。體外實(shí)驗(yàn)揭示乳白肽C1體外抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性(IC50)為18.06μM，明顯高于乳白肽(IC50：4.14μM)。

本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

1、本發(fā)明的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1降壓效果更強(qiáng)，半衰期長(zhǎng)，可以減少患者的用藥次數(shù)，提高患者的依從性，節(jié)省醫(yī)療費(fèi)用。

2、本發(fā)明的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1的合成技術(shù)成熟，操作簡(jiǎn)便。

3、本發(fā)明的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽LAP-C1的合成方法中副反應(yīng)少。

附圖說明

圖1為血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽LAP-C1的質(zhì)譜分析圖譜。

圖2為Hip?0.112mmol/L與HHL?0.29mmol/L標(biāo)準(zhǔn)品圖譜。

圖3為對(duì)照組a：50ul血管緊張素轉(zhuǎn)化酶+10ul緩沖液+200ulHHL(1.523mmol/L)+250HCL，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性圖譜。

圖4為抑制劑組b：50ul血管緊張素轉(zhuǎn)化酶+10ulLAP-C1(18.06umol/L)+200ulHHL(1.523mmol/L)+250HCL，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性變化圖譜。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖所示實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。