[發(fā)明專利]一種防治香蕉枯萎病的不吸水鏈霉菌株BWL58及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110296029.5
• 申請日: 2011-09-28
• 公開（公告）號(hào): CN102329755A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾濤;曾會(huì)才;陳漢清;莫坤聯(lián);李戈
• 申請（專利權(quán)）人: 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院海口實(shí)驗(yàn)站
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/465
• 代理公司: 廣州知友專利商標(biāo)代理有限公司 44104
• 代理人: 宣國華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種防治香蕉枯萎病的菌株及其應(yīng)用，具體涉及一種防治香蕉枯萎病的不吸水鏈霉菌株BWL58及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

香蕉枯萎病是由尖孢鐮刀菌古巴專化型(Fusarium?oxysporum?f.sp.cubense)侵染引起的一種香蕉生產(chǎn)上的毀滅性土傳病害。該病原菌有4個(gè)生理小種，在我國分布的是1號(hào)和4號(hào)兩個(gè)生理小種，對我國香蕉產(chǎn)業(yè)危害最大的是4號(hào)生理小種，目前已在海南、廣東、云南、福建大部分香蕉種植區(qū)大面積發(fā)生，發(fā)病面積已超過50萬畝。廣東和海南香蕉枯萎病發(fā)病嚴(yán)重的地方已不能再規(guī)模化種植香蕉，不得不改種其它作物。

香蕉枯萎病菌是土壤習(xí)居菌，它從香蕉的根部侵入，沿維管束往上擴(kuò)散蔓延，堵塞導(dǎo)管，產(chǎn)生毒素，破壞維管束的水分和養(yǎng)分的輸送功能，從而使香蕉植株的地上部分得不到水分和養(yǎng)分而發(fā)黃枯萎。病原菌的厚垣孢子可在土壤中存活10多年，是一種積年流行的病害。

由于香蕉枯萎病病原菌在維管束內(nèi)擴(kuò)展侵染，至今尚無十分有效的化學(xué)藥劑防治和高抗枯萎病品種。因此，生物防治受到廣泛關(guān)注。已報(bào)道或申請專利的香蕉枯萎病生物防治措施，大部分是采用芽孢桿菌作為生防菌株，這類菌株作為生防菌有許多優(yōu)點(diǎn)，但也存在一個(gè)嚴(yán)重不足，即菌株本身對病原菌的拮抗能力不強(qiáng)，從而有可能影響其生防效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種防治香蕉枯萎病的不吸水鏈霉菌株BWL58，該菌株對香蕉枯萎病病原菌的拮抗能力強(qiáng)，由于菌株本身分離自植物根際土壤，是土壤習(xí)居菌，根際定殖能力強(qiáng)，生防效果良好。

本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供上述不吸水鏈霉菌株BWL58在防治香蕉枯萎病中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供一種含有上述不吸水鏈霉菌株BWL58的制劑。

本發(fā)明的第四個(gè)目的在于提供上述制劑的制備方法，該制備方法工藝簡單，發(fā)酵培養(yǎng)基無需貴重原料，成本低，容易推廣。

本發(fā)明的最后一個(gè)目的在于提供上述制劑在防治香蕉枯萎病中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第一個(gè)目的是通過如下技術(shù)手段來實(shí)現(xiàn)的：一種防治香蕉枯萎病的不吸水鏈霉菌株BWL58，該菌株BWL58的分類命名為不吸水鏈霉菌(Streptomyces?ahygroscopicus)，于2011年5月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC?No.4837。

該菌株的16S?rDNA部分基因序列(1491bp)已提交美國國家生物技術(shù)信息中心(NCBI)的Genebank基因序列數(shù)據(jù)庫，登錄號(hào)為JN038326，該菌株BWL58的16S?rDNA核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

本發(fā)明的第二個(gè)技術(shù)方案是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：上述不吸水鏈霉菌株BWL58在防治香蕉枯萎病中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第三個(gè)技術(shù)方案是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：一種防治香蕉枯萎病的制劑，含有上述菌株BWL58的液體菌劑或固體菌劑。

本發(fā)明的第四個(gè)技術(shù)方案是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：上述防治香蕉枯萎病的制劑的制備方法，將上述不吸水鏈霉菌株BWL58經(jīng)含菌種活化、液體或固體發(fā)酵工序制備獲得液體菌劑或固體菌劑。

其中，上述防治香蕉枯萎病的制劑的制備方法中，還可以含有種子培養(yǎng)工序，即將上述不吸水鏈霉菌株BWL58經(jīng)含菌種活化、種子培養(yǎng)、液體或固體發(fā)酵工序制備獲得液體菌劑或固體菌劑。

具體來說，本發(fā)明中的液體菌劑可以通過以下工藝流程獲得的：菌種BWL58活化(即一級種子培養(yǎng))→菌種培養(yǎng)(即二級種子培養(yǎng)，可選)→液體發(fā)酵(發(fā)酵罐，無菌空氣，培養(yǎng)液)→液體菌劑。

其中液體培養(yǎng)基中液體發(fā)酵時(shí)采用的培養(yǎng)基可以包括葡萄糖1-3％、黃豆餅粉1-4％、可溶性淀粉1-4％、酵母膏0.2％、NaCl?0.4％、CaCO₃0.25％、消泡劑0.1-0.3％，按質(zhì)量百分含量計(jì)，其余為水。以上為本發(fā)明優(yōu)選的培養(yǎng)基，實(shí)際上本發(fā)明對培養(yǎng)條件和液體培養(yǎng)基并沒有特別嚴(yán)格的限制，只要該條件和液體培養(yǎng)基適合菌株的生長即可。

具體來說，本發(fā)明中的固體菌劑可以通過如下工藝流程獲得：菌種BWL58活化(即一級種子培養(yǎng))→菌種培養(yǎng)(即二級種子培養(yǎng)，可選)→固體培養(yǎng)基質(zhì)→發(fā)酵餅(固體發(fā)酵)→干燥粉碎，干燥粉碎后獲得的發(fā)酵餅與吸附載體按1∶1或者其它比例混合，混勻后適當(dāng)干燥，制成固體菌劑。其中吸附載體可為高嶺土、非耕作層土等多種載體。