[發明專利]檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒及制備方法

無效

• 申請號: 201110294597.1
• 申請日: 2011-09-29
• 公開（公告）號: CN102393461A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 陳家旭;蔡玉春;郭儉;陳韶紅;田利光;陳木新;張玲玲;艾琳;周洋
• 申請（專利權）人: 中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 上海世貿專利代理有限責任公司 31128
• 代理人: 嚴新德

1.一種檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，包括一個盒體，其特征在于：所述的盒體中設置有一個墊板，所述的墊板的上側的一端設置有一個樣品墊，所述的墊板的上側的另外一端設置有一個末端吸水墊，所述的墊板的中部設置有一個檢測層，所述的檢測層和所述的末端吸水墊緊密連接，在所述的樣品墊和所述的檢測層之間設置有一個金標墊，所述的金標墊上含有膠體金標記的抗血吸蟲病循環抗原單克隆抗體，所述的樣品墊、金標墊和所述的檢測層緊密連接，在所述的檢測層上包被有檢測線和質控線，所述的盒體的正面上設置有一個加樣孔和一個觀察孔，所述的加樣孔位于樣品墊上方，所述的觀察孔位于所述的檢測線和質控線的上方。

2.如權利要求1所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的檢測層的一端設置在所述的金標墊的下側，所述的金標墊的一端設置在所述的樣品墊的下側。

3.如權利要求2所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的檢測層的另一端設置在所述的末端吸水墊的下側。

4.如權利要求1所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的檢測層為硝酸纖維素膜。

5.如權利要求1所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的檢測線是用質量百分比濃度為1～3％的甲醛固定液固定濃度為0.8～1.5mg/ml的抗血吸蟲可溶性抗原的單克隆抗體IgG2b后，均勻地噴在檢測層中段制成。

6.如權利要求5所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的抗血吸蟲可溶性抗原的單克隆抗體IgG2b由保藏號為CGMCC?NO：4978的小鼠雜交瘤細胞產生。

7.如權利要求1所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的質控線是將質量百分比濃度為1～3％的甲醛固定液固定濃度為2～2.5mg/ml的羊抗鼠IgG或IgM后，均勻地噴在檢測層上制成，所述的質控線靠近所述的末端吸水墊，距離檢測線0.5～1cm。

8.如權利要求1所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的金標墊包括一個纖維膜，所述的纖維膜上噴設有標記好膠體金的抗血吸蟲可溶性抗原單克隆抗體IgM，噴液量為0.8～2.0μl/cm。

9.如權利要求8所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的纖維膜為玻璃纖維膜。

10.如權利要求8所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒，其特征在于：所述的抗血吸蟲可溶性抗原單克隆抗體IgM由保藏號為CGMCC?NO：3642的小鼠雜交瘤細胞產生。

11.權利要求1所述的檢測血吸蟲病循環抗原的膠體金免疫層析試劑盒的制備方法，其特征在于：包括一個采用雜交瘤技術制備抗血吸蟲可溶性抗原的單克隆抗體的步驟，所述的抗血吸蟲可溶性蟲卵抗原的特異單克隆抗體用于制備膠體金標記的單克隆抗體和檢測單克隆抗體，包括一個制備膠體金的步驟，包括制備一個膠體金標記抗血吸蟲可溶性抗原的單克隆抗體IgM的步驟，包括一個制備金標墊的步驟，當制備好的膠體金與待標記的單克隆抗體成功結合后，用二維噴動儀將標記好膠體金的單克隆抗體均勻地噴在玻璃纖維膜上，包括一個制備檢測層中檢測線和質控線的步驟，將抗血吸蟲可溶性抗原的單克隆抗體IgG2b均勻地噴在檢測層中段，得到檢測線，將羊抗鼠IgG或IgM，均勻地噴在檢測層上，距離檢測線0.5～1cm處得到質控線，包括一個制備盒體和墊板的步驟，將墊板設置在所述的盒體中，將檢測層粘貼在墊板上，將墊板設置在所述的盒體中。