[發(fā)明專利]蓖麻雜交種CSR24.181種子純度的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110293343.8
• 申請日: 2011-09-29
• 公開（公告）號: CN102618629A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 嚴興初;譚美蓮;嚴明芳;汪磊;王力軍
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 武漢帥丞知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42220
• 代理人: 朱必武

1.蓖麻雜交種“CSR24.181”種子純度的檢測方法，包括以下步驟：

（1）提取蓖麻雜交種種子幼苗葉片基因組DNA；

（2）以所述的基因組DNA為模板，選用SSR引物對進行PCR擴增，所述的SSR引物序列選自如下的一種或多種：

引物Rco23

?????F：CATGGATGTAGAGGGTCGAT

?????R：CAGCCAAGCCAAAGATTTTC

引物Rco26

F：TTGCTTGTCAAAGGGGAGTT

?????R：TCATTTTGAGGGAGAAACCA

引物Rco29

F：GGAGAAAAGAAAGGGAGAAGG

?????R：GCCAAAAGCACACTTAATTTGA

引物RC05

F：CATCACCTCTATCCATCCGTTT

?????R：CCTTCATCATTGAACTCCCTTC

引物RC61

F：GCACTGAGGGTTAATTCTGGAC

?????R：GTCGTAGACCACCTTAGCATCC

引物RC129

F：TACTGCAACTCAATCCACTGCT

?????R：GATAGTGCCTTTGCCTCTTTTC

引物RC242

F：ACCCCTGCAAAACCCTAATAAT

?????R：TTCGGTGTAAAGAATCCGACTT

（3）對擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳；

（4）對電泳結(jié)果進行分析，只有同時具有親本特異條帶的單株才為真正的“CSR24.181”雜交種，檢測得到的純度結(jié)果的平均值即為其品種種子的純度；其中：

引物Rco23產(chǎn)生條帶大小分別為440bp和600bp的母本特異標記Rco23₄₄₀和Rco23_600?，產(chǎn)生條帶大小分別為400bp和580bp的父本特異標記Rco23₄₀₀和Rco23₅₈₀；

引物Rco26產(chǎn)生條帶大小為700bp的母本特異標記Rco26₇₀₀，產(chǎn)生條帶大小為705bp的父本特異標記Rco26₇₀₅；

引物Rco29產(chǎn)生條帶大小為560bp的母本特異標記Rco29₅₆₀，產(chǎn)生條帶大小為580bp的父本特異標記Rco29₅₈₀；

引物RC05產(chǎn)生條帶大小分別為330bp和570bp的母本特異標記RC05₃₃₀和RC05₅₇₀，產(chǎn)生條帶大小分別為360bp和600bp的父本特異標記RC05₃₆₀和RC05₆₀₀；

引物RC61產(chǎn)生條帶大小為220bp的母本特異標記RC61₂₂₀，產(chǎn)生條帶大小為210bp的父本特異標記RC61₂₁₀；

引物RC129產(chǎn)生條帶大小為695bp的母本特異標記RC129₆₉₅，產(chǎn)生條帶大小為690bp的父本特異標記RC129₆₉₀；

引物RC242產(chǎn)生條帶大小為680bp的母本特異標記RC242₆₈₀，產(chǎn)生條帶大小分別為685bp和690bp的父本特異標記RC242₆₈₅和RC242₆₉₀。