[發明專利]金銀花組培繁殖方法無效
| 申請號: | 201110292502.2 | 申請日: | 2011-10-04 | 
| 公開(公告)號: | CN102405839A | 公開(公告)日: | 2012-04-11 | 
| 發明(設計)人: | 何全慧;李大根;楊再江;趙勇彪;祝利 | 申請(專利權)人: | 重慶市秀山紅星中藥材開發有限公司 | 
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 | 
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 | 
| 地址: | 409900 重慶市秀山土*** | 國省代碼: | 重慶;85 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 金銀花 繁殖 方法 | ||
1.金銀花組培繁殖方法,其特征在于以帶腋芽的金銀花枝條為材料,進行金銀花腋條組織培養繁殖,其步驟如下:
引種和誘導:從室外選取健壯、無病蟲害帶腋芽或頂芽的金銀花嫩莖段,截成10-13cm的小段,剪去葉,留葉柄基部,用洗衣粉溶解于水清洗3-5分鐘,再放到濃度為0.1%的升汞液中處理15-17分鐘,然后用無菌水清洗4-5次,徹底除去升汞;接著取出外植體,用無菌濾紙吸干多余水分;
⑵分化培養:接種在分化培養基上,培養溫度25-28℃,濕度50%,光照強度1500-3000Lx,光照時間為每天10-12小時;
⑶增殖培養:腋芽長出2-3cm時,進行分段處理,剪切成2.0-2.5cm長的莖段,將莖段轉接至叢生芽增殖培養基上,培養溫度25-28℃,濕度50%,光照強度1500-3000Lx,光照時間為每天10-12小時;
⑷生根培養:選取生長健壯高達2.5cm的無根小苗,切成單株后接種到生根培養基上,在溫度23-25℃、濕度50%,光照強度1500-3000Lx,光照時間為每天10-12小時的環境下培養20天。
2.根據權利要求1所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于分化培養基為MB?+BA1.0-2.0mg/L+NAA0.3-0.5mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂,pH值為5.8。
3.根據權利要求1所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于叢生芽增殖培養基為MB50ml+微量元素3.3ml+鐵鹽5ml+有機物5ml+6-BA0.4ml+IBA0.1ml+白糖30g+卡拉膠6g,pH值為5.8。
4.根據權利要求1所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于生根培養基為:MB25ml+有機物、鐵鹽、微量元素各5ml+IBA3ml+糖20g+卡拉膠6g+AC0.5g,pH值為5.8。
5.根據權利要求2-4所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于MB母液培養基由大量元素、鐵鹽、微量元素、有機物和激素組成,其具體配制成分和重量比為:
大量元素:硝酸鉀1.5g、二水氯化鈣0.3g、硝酸鎂0.22g、磷酸二氫鉀0.17g、硝酸銨0.15g、硫酸銨0.2g、磷酸二氫鈉0.04g;
⑵鐵鹽:EDTA0.0373g、硫酸亞鐵0.0278g;
⑶微量元素:碘化鉀0.00083g、七水硫酸鋅0.0086g/L、硼酸0.0062g、一水硫酸錳0.0223g、二水鉬酸鈉0.00025g、無水硫酸銅0.000025g、氯化鈷0.000025g;
⑷有機物:甘氨酸0.002g、煙酸0.0005g、鹽酸吡哆辛0.0005g、鹽酸硫胺0.0004g、肌醇0.05g;
激素(單獨配制):6-BA1g/L、IBA1g/L、NAA1g/L。
6.根據權利要求2-5所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于各培養基需要滅菌,將配制好的培養基裝進滅菌器里,調節溫度達到121℃時,記時滅菌21分鐘,滅菌完后,迅速儲存到無菌室。
7.根據權利要求1所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于步驟2中,分化培養時每管接種1芽。
8.根據權利要求1所述的金銀花組培繁殖方法,其特征在于步驟3中,增殖培養時每瓶接種3-5芽。
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