[發明專利]小分子化合物TWS119作為神經干細胞分化誘導劑的新應用

無效

• 申請號: 201110291147.7
• 申請日: 2011-09-30
• 公開（公告）號: CN103031274A
• 公開（公告）日: 2013-04-10
• 發明（設計）人: 田杰
• 申請（專利權）人: 北京清美聯創干細胞科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0793
• 分類號: C12N5/0793
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.TWS119(4，6-二取代吡咯[2，3-d]嘧啶)作為誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的誘導劑的新應用。

2.誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基，其特征在于：所述細胞培養基中含有誘導劑TWS119。

3.根據權利要求2所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基，其特征在于所述細胞培養基中含有濃度為200～500nM的誘導劑TWS119。

4.根據權利要求3所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基，其特征在于所述細胞培養基中含有濃度為350nM的誘導劑TWS119。

5.根據權利要求2、3、4之任一權利要求所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基，其特征在于所述細胞培養基中還含有胎牛血清。

6.根據權利要求5所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基，其特征在于所述細胞培養基中還含有體積百分濃度為5～20％的胎牛血清。

7.根據權利要求6所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基，其特征在于所述細胞培養基中還含有體積百分濃度為10％的胎牛血清。

8.權利要求2所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基的制備方法，包括以下步驟：

a.DMEM/F12基礎培養液的制備：取制備DMEM/F12基礎培養液1L用量的DMEM/F12(1∶1)干粉1袋、谷氨酰胺2.5g，用濃度為0.1mol/L、pH值為7.35的磷酸鹽緩沖液即PBS溶解并稀釋至1L，調節pH值為7.5，用0.2um微孔濾膜過濾除菌，即得；

b.細胞培養基的制備：按照制備100ml細胞培養基計，將誘導劑TWS119(200～500nM)加入步驟a制得的DMEM/F12基礎培養液70ml使溶解，用0.2um微孔濾膜過濾除菌后，加入胎牛血清5～20ml、青霉素與鏈霉素的混合液(即由濃度為4萬U/ml的青霉素溶液、濃度為4萬U/ml的鏈霉素溶液按1∶1混合而成)的溶液1ml，最后用DMEM/F12基礎培養液定容至100ml，即得。

9.根據權利要求8所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基的制備方法，其特征在于步驟b中誘導劑TWS119的終濃度為350nM。

10.根據權利要求9所述的誘導哺乳動物神經干細胞向神經元分化的細胞培養基的制備方法，其特征在于步驟b中誘導劑TWS119的終濃度為350nM，胎牛血清的加入量為10ml。