[發明專利]一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法

有效

• 申請號: 201110290961.7
• 申請日: 2011-09-16
• 公開（公告）號: CN102392060A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 劉振濤;陳順記;劉利紅;喬文慶;蓋來兵
• 申請（專利權）人: 石藥集團中潤制藥(內蒙古)有限公司
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;C12P37/00;C12P7/62;C12P37/04;C07C229/36;C07C227/40;C07C227/42;C07D499/42;C07D499/18
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技術領域

本發明涉及一種酶法合成阿莫西林母液中有效成份的回收方法，特別是涉及一種通過納濾濃縮，對酶法合成阿莫西林母液中非活性側鏈D-羥基苯甘氨酸和母核6-氨基青霉烷酸的回收方法。

背景技術

通常合成阿莫西林有兩種方法即：化學合成法和酶合成法。化學法合成阿莫西林涉及較多的化學反應步驟和苛刻的反應條件，如-50度的低溫環境，在反應過程中需要使用有機溶劑和化學試劑，如二氯甲烷、N，N-二甲基乙酰胺、吡啶、三乙胺、丙酮、特戊酰氯等，對環境不友好。

酶法合成阿莫西林是母核和活性側鏈在青霉素酰化酶催化的中性環境、室溫條件下，水相溶液中攪拌即可完成，大大地減少了生產環節，避免了有機溶劑和試劑的使用，整個過程較綠色環保。同時，在產品質量上，酶法合成的阿莫西林純度高于化學法合成的產品，藥物安全性和藥物的穩定性更高，因此，酶法合成的阿莫西林頗受臨床醫生和患者的青睞。

正因為如此，近幾年酶法阿莫西林的工藝技術越來越受到制藥企業與研究者的關注。美國專利US6048708中公開了一種酶促合成β-內酰胺抗生素的方法，該方法使用較高濃度的抗生素母核與側鏈供體來提高母核的轉化率。

一般來講，酶法合成阿莫西林，為了使母核的轉化率高，活性側鏈的供應都是過量的，這樣，受阿莫西林合成酶水解活性的影響，側鏈的水解會產生一部分非活性側鏈-D-羥基苯甘氨酸，因此母液中含有相應的非活性側鏈、母核和少量阿莫西林產品，酶的水解活性越高，殘余量就越大，使酶法合成阿莫西林的經濟性大打折扣，成為阿莫西林酶法工藝產業化推廣的瓶頸。因此，對這些物質的回收再利用是非常必要的。

專利CN96199571介紹了抗生素母液的回收方法，其方法為通過酶水解母液中抗生素后，分解成為其起始化合物，然后通過降低pH來分離母核和酰化劑水解產物。然而在我們的實驗中，模擬其方法處理阿莫西林母液，并不能得到其描述的效果，其原因在于：在我們的酶法阿莫西林母液中，6-氨基青霉烷酸母核和D-羥基苯甘氨酸的濃度較低，不經過濃縮不能實現結晶。因此本發明通過納濾濃縮，使6-氨基青霉烷酸母核和D-羥基苯甘氨酸的濃度顯著提高，從而實現6-氨基青霉烷酸母核和D-羥基苯甘氨酸的結晶分離。

本發明涉及一種酶法阿莫西林母液中有效成份非活性側鏈和母核的回收方法，其中非活性側鏈指阿莫西林側鏈的水解產物D-羥基苯甘氨酸，母核為6-氨基青霉烷酸。通過回收側鏈和母核，可以間接提升酶法合成的轉化率，降低原材料的消耗，從而降低生產成本。

回收阿莫西林母液中的D-羥基苯甘氨酸、6-氨基青霉烷酸，必須要實現母液中阿莫西林、D-羥基苯甘氨酸、6-氨基青霉烷酸的分離，然而在化學結構上這三種物質均含有氨基和羧基，屬兩性化合物，三種物質的等電點較為接近，因此單純依靠等電結晶達不到分離的目的。

本發明涉及一種先對酶法合成阿莫西林母液進行處理，使阿莫西林水解為6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸，再通過納濾使母液中的有效成份得到濃縮。然后再利用6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸的濃度差異，通過等電結晶使大量D-羥基苯甘氨酸結晶分離出來。

分離D-羥基苯甘氨酸后的母液主要成分是6-氨基青霉烷酸，可以直接作為6-氨基青霉烷酸的溶解液，返回酶法合成阿莫西林的源頭，直接重復利用；D-羥基苯甘氨酸經過甲酯化，形成活性側鏈，做為阿莫西林合成的起始原料。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種利用納濾對酶法合成阿莫西林母液中有效成份的回收方法，包括如下步驟：

一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其包括如下步驟：

(1)調節母液pH：利用堿將母液pH調節到9.0～9.5，堿為氨水或氫氧化鈉的任一種，將母液中的微量的結晶顆粒全部溶解，使各有效成份以鹽的形式溶解于母液中；

(2)利用青霉素酰化酶處理上述母液，使母液中的阿莫西林和D-羥基苯甘氨酸甲酯水解為D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸。

(3)納濾濃縮利用青霉素酰化酶處理的上述母液，隨著納濾循環的進行，水和少量無機鹽將被透析除去，母液中有效成份D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸將被濃縮，濃度提高；

(4)等電結晶分離回收6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸：利用D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸的濃度差異和等電點差異，通過對上述母液滴加酸，酸為鹽酸，調節pH至3.5-5.0，使絕大多數D-羥基苯甘氨酸以結晶的形式從母液中分離出來，從而實現D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸的分離。