[發(fā)明專利]一種高純度肝素芐酯鹽及其制法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110288773.0
• 申請(qǐng)日: 2011-09-26
• 公開（公告）號(hào): CN103012620A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐美英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 徐美英
• 主分類號(hào): C08B37/10
• 分類號(hào): C08B37/10;C08L5/10;A61K31/727;A61P7/02;A61P9/10;A61P9/00
• 代理公司: 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及由一種高純度肝素芐酯鹽，及其制備方法與在制備低分子肝素中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

肝素是動(dòng)物(豬或牛)來源的硫酸多糖混合物，由于它們具有良好的抗血栓形成性質(zhì)，因而得到了廣泛應(yīng)用，例如制備抗血栓形成藥物、治療心血管疾病的藥物、和治療腦血管疾病的藥物等。

然而，天然肝素有許多缺陷，這些缺陷限制肝素的應(yīng)用。一個(gè)主要缺陷是肝素用藥過多可致自發(fā)性出血，故每次注射前應(yīng)測(cè)定凝血時(shí)間。此外，長(zhǎng)期使用，肝素還可引起過敏反應(yīng)、血小板減少、骨質(zhì)疏松和自發(fā)性骨折。

肝素鈉自發(fā)性出血危險(xiǎn)很大，臨床使用中必須監(jiān)測(cè)凝血時(shí)間，這給醫(yī)生和患者均帶來很大不便。同時(shí)，血小板減少和骨質(zhì)疏松等不良反應(yīng)也讓醫(yī)生在使用中有所顧忌。低分子肝素使用過程中無須監(jiān)測(cè)凝血時(shí)間，并且大大降低了肝素長(zhǎng)期使用產(chǎn)生的上述不良反應(yīng)。

目前，制備低分子肝素的主要方法有亞硝酸鹽降解法、過氧化氫降解法、肝素酶降解法以及肝素芐酯的堿降解法等。其中，肝素芐酯的堿降解法是將肝素與季銨鹽成鹽，然后將肝素季銨鹽與氯化芐在二氯甲烷中發(fā)生酯化反應(yīng)生成肝素芐酯季銨鹽，往此溶液中加入醋酸鈉甲醇溶液，過濾獲得肝素芐酯鈉鹽，根據(jù)酯化率的高低，選擇相應(yīng)的降解條件，將此鈉鹽在堿性溶液中進(jìn)行降解，獲得低分子肝素。由此可見，如何準(zhǔn)確測(cè)定酯化率在整個(gè)制備方法中非常關(guān)鍵。另外，由于低分子肝素是混合物，過程控制雜質(zhì)變得非常重要。因此，高純度的肝素芐酯堿金屬或堿土金屬鹽是獲得高質(zhì)量低分子肝素的前提。

然而，上述制備方法具有如下缺點(diǎn)：(1)肝素芐酯鈉鹽純度低：當(dāng)醋酸鈉甲醇溶液與肝素芐酯季銨鹽反應(yīng)生成肝素芐酯鈉鹽時(shí)，由于肝素為大分子長(zhǎng)鏈，肝素芐酯鈉鹽在甲醇中溶解度很低，隨著醋酸鈉甲醇溶液的加入，來不及反應(yīng)的含有季銨鹽的肝素芐酯鈉鹽同時(shí)被沉淀出，這樣導(dǎo)致反應(yīng)不完全。實(shí)驗(yàn)證明，即使進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的攪拌或多次與醋酸鈉甲醇溶液重復(fù)反應(yīng)，但畢竟是混懸狀態(tài)，仍有相當(dāng)部分的季銨鹽不能全部反應(yīng)，從而殘留在肝素芐酯鈉鹽鏈上。(2)肝素芐酯鈉鹽的酯化率難以精確測(cè)定：由于反應(yīng)為非溶液狀態(tài)，反應(yīng)物和產(chǎn)物均為沉淀，每次反應(yīng)的程度均不易重現(xiàn)，季銨鹽、氯化芐和醋酸鈉殘留每次都會(huì)有差異，這給酯化率的測(cè)定帶來了不確定性，從而影響后續(xù)的降解條件的選擇，進(jìn)而影響產(chǎn)品的質(zhì)量，甚至?xí)绊懮a(chǎn)的成功率。(3)最終產(chǎn)品的安全性隱患：反應(yīng)過程中生成的季銨鹽和過量的氯化芐及醋酸鈉均不易被甲醇洗掉，會(huì)殘留在產(chǎn)品中。在后續(xù)降解中也會(huì)產(chǎn)生新的雜質(zhì)，給產(chǎn)品的安全性帶來隱患。(4)難以產(chǎn)業(yè)化：肝素芐酯鈉鹽制備過程中獲得的沉淀粘稠，難以過濾及純化，同時(shí)需要大量甲醇洗滌沉淀，產(chǎn)業(yè)化難度大，成本高。

也有文獻(xiàn)中提到，生成肝素芐酯季銨鹽后，先將反應(yīng)溶媒四氫呋喃直接蒸餾除去，然后加入甲醇混懸沉淀，過濾獲得肝素芐酯季銨鹽，然后將其加入醋酸鈉的水溶液，生成肝素芐酯鈉鹽。這種制備方法需要先蒸餾除去反應(yīng)溶媒，而實(shí)驗(yàn)證明，肝素芐酯季銨鹽易溶于甲醇，因此蒸去反應(yīng)溶媒后加入甲醇并不能得到沉淀，同時(shí)大大增加了產(chǎn)業(yè)化的難度和成本。

因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)高純度的肝素芐酯鹽，以及簡(jiǎn)單可行、適合產(chǎn)業(yè)化的制備方法及其在低分子肝素制備中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是提供一種高純度的肝素芐酯鹽，以及其簡(jiǎn)單可行、適合產(chǎn)業(yè)化的制備方法及其在低分子肝素制備中的應(yīng)用。

在本發(fā)明的第一方面，提供了一種高純度肝素芐酯堿金屬鹽或堿土金屬鹽的制備方法，包括步驟：

(a)將肝素芐酯季銨鹽或含肝素芐酯季銨鹽的原料，與堿金屬或堿土金屬鹽的水性溶液進(jìn)行混合，從而生成肝素芐酯堿金屬鹽或堿土金屬鹽；和

(b)在步驟(a)所形成反應(yīng)混合物中，加入對(duì)于肝素芐酯堿金屬鹽或堿土金屬鹽而言的不溶性溶劑，從而沉淀并分離出所述肝素芐酯堿金屬鹽或堿土金屬鹽。

在另一優(yōu)選例中，所述的含肝素芐酯季銨鹽的原料中肝素芐酯季銨鹽占原料中肝素鹽(肝素芐酯季銨鹽+肝素季銨鹽等)的20-99.9wt％，較佳地30-99wt％，更佳地40-95wt％。

在另一優(yōu)選例中，所述的肝素芐酯季銨鹽是肝素季銨鹽與芐基鹵化物在有機(jī)溶劑中發(fā)生酯化反應(yīng)生成的反應(yīng)產(chǎn)物。

肝素是來源于牛、豬的肝素，即豬肝素或牛肝素及其衍生物。

在另一優(yōu)選例中，所述芐基鹵化物為鹵化芐，較佳為氯化芐或溴化芐，更佳為氯化芐。

在另一優(yōu)選例中，所述有機(jī)溶劑為二氯甲烷。

在另一優(yōu)選例中，所述堿金屬鹽為氯化鈉、醋酸鈉、氯化鉀、或硫酸鈉；所述堿土金屬鹽為氯化鈣、或氯化鎂。

較佳為醋酸鈉，更佳地為氯化鈉。