[發明專利]一種從鴨肌肉中分離磷脂綁定蛋白的方法

無效

• 申請號: 201110286476.2
• 申請日: 2011-09-26
• 公開（公告）號: CN102321166A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 王道營;張牧焓;卞歡;劉芳;諸永志;徐為民
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C07K14/465
• 分類號: C07K14/465;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18
• 代理公司: 揚州市錦江專利事務所 32106
• 代理人: 江平

1.一種從鴨肌肉中分離磷脂綁定蛋白的方法，包括以下步驟：

1）鴨肌肉組織剁碎后加入Tris-HCl緩沖液中勻漿，將漿液靜止1小時；

2）將漿液離心，取上清液，在上清液中加入75%飽和度的硫酸銨進行鹽析，然后離心，將沉淀物用Tris-HCl緩沖液溶解，取得混合溶液；

3）將混合溶液置于透析袋中，在Tris-HCl緩沖液中進行去鹽透析，取得去鹽的透析物；

4）將去鹽的透析物離心去除變性蛋白，取得磷脂綁定蛋白粗品；

5）將磷脂綁定蛋白粗品純化后，得磷脂綁定蛋白純品；

其特征在于：所述步驟5）中純化方法是：采用source?15Q、10cm×1.0cm的離子交換柱，用pH為7.5、濃度為50mmol/L、流速為0.2mL/min?的Tris-HCl緩沖液平衡，待紫外吸收和電導基線穩定后，再用pH為7.5、含1.5mol/LNaCl的Tris-HCl緩沖液進行線性洗脫，控制NaCl的Tris-HCl緩沖液進入離子交換柱的流速為1.5mL/min，開始收集濾出液，當濾出液的NaCl濃度達到100%時停止收集；將收集的濾出液進行超濾濃縮，取得磷脂綁定蛋白純品。