[發明專利]抗細胞型朊蛋白單克隆抗體在制備抗腫瘤藥物中的應用

有效

• 申請號: 201110284158.2
• 申請日: 2011-09-22
• 公開（公告）號: CN103013927A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 陳佺;杜蕾;王珺;金海京;王曉慧
• 申請（專利權）人: 中國科學院動物研究所
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C12N15/12;C12N15/63;C12N1/21;C07K16/18;C07K14/47;A61K39/395;A61P35/00;C12R1/91
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 劉丹妮

技術領域

本發明涉及一種與人體正常粘膜所分泌的天然蛋白-細胞型朊蛋白(cellular?prion?protein)，相結合的單克隆抗體的雜交瘤，由該雜交瘤產生的抗細胞型朊蛋白單克隆抗體及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

結直腸癌是世界第三大惡性腫瘤。近二十多年來，結直腸癌發病率逐年上升，尤其是亞洲國家結直腸癌發病率上升趨勢十分明顯，致死率居高不下，位居癌癥死因的第二位。目前，世界上治療腫瘤的主要方法是手術、放療、化療和生物治療等四種。從醫學角度看，至今腫瘤的治療沒有一種完全有效的手段，尤其是已經發生轉移的腫瘤患者，傳統的治療方法無法控制腫瘤的全身擴散。

編碼細胞型朊蛋白的基因PRNP定位于20號染色體，基因全長20kb，包含2個外顯子。PRNP基因轉錄的mRNA長度為2.5kb(NM_000311)，編碼由253個氨基酸組成的蛋白質，具有高度不穩定的5個串聯八肽重復區(5?tandem?octapeptide重復區)。細胞型朊蛋白與瘋牛病致病性朊病毒蛋白具有相同的氨基酸序列，為同一個基因PRNP所編碼。但在三級結構方面，細胞型朊蛋白具有豐富的α螺旋的三級結構，而致病性朊蛋白表現為β折疊。

相對于朊病毒的研究，細胞型朊蛋白的功能尚未得到明確的認識。朊蛋白基因敲除小鼠的研究提示細胞型朊蛋白缺失后小鼠會出現心律失常、晝夜節律改變等癥狀。目前已經發現細胞型朊蛋白與乳腺癌、前列腺癌、肝癌和結腸癌等多種腫瘤相關(Mehrpour，M.；Codogno，P.，2009.Cancer?Lett.，290：1-23)，在胃癌和乳腺癌中細胞型朊蛋白表達與Bcl-2上調相關，參與發揮抑制細胞凋亡功能(Liang，J.；Pan，Y.L.；Ning，X.X.；Sun，L.J.；Lan，M.；Hong，L.；Du，J.P.；Liu，N.；Liu，C.J.；Qiao，T.D.；Fan，D.M.，2006.Tumour.Biol.，27：84-91)(Li，Q.Q.；Cao，X.X.；Xu，J.D.；Chen，Q.；Wang，W.J.；Tang，F.；Chen，Z.Q.；Liu，X.P.；Xu，Z.D.，2009.Cell?Mol.Life?Sci.，66：504-515)。細胞型朊蛋白能抵抗腫瘤壞死因子RNF-α和TRAIL引起的乳腺癌細胞凋亡(Diarra-Mehrpour，M.；Arrabal，S.；Jalil，A.；Pinson，X.；Gaudin，C.；Pietu，G.；Pitaval，A.；Ripoche，H.；Eloit，M.；Dormont，D.；Chouaib，S.，2004.Cancer?Res.，64：719-727)(Meslin，F.；Hamai，A.；Gao，P.；Jalil，A.；Cahuzac，N.；Chouaib，S.；Mehrpour，M.，2007.Cancer?Res.，67：10910-10919)，此外還有報道指出細胞型朊蛋白通過增加葡萄糖水平上升來促進結腸癌細胞生存(Li，Q.Q.；Sun，Y.P.；Ruan，C.P.；Xu，X.Y.；Ge，J.H.；He，J.；Xu，Z.D.；Wang，Q.；Gao，W.C.，2011.Cancer?Sci.，102：400-406)。Dodelet等人報道細胞型朊蛋白對于CD34+造血干細胞的自我更新是必須的(Dodelet，V.C.；Cashman，N.R.，1998.Blood，91：1556-1561)，Weinberg的研究結果提示細胞型朊蛋白可能與乳腺細胞球狀體形成相關(Liao，M.J.；Zhang，C.C.；Zhou，B.；Zimonjic，D.B.；Mani，S.A.；Kaba，M.；Gifford，A.；Reinhardt，F.；Popescu，N.C.；Guo，W.；Eaton，E.N.；Lodish，H.F.；Weinberg，R.A.，2007.Cancer?Res.，67：8131-8138)。盡管以上報道提示細胞型朊蛋白可能與多種腫瘤相關，但是細胞型朊蛋白在人類腫瘤中的具體生理功能至今還不清楚，對于腫瘤發生、發展的作用機制未見報道。