[發明專利]咖啡廢渣提取物在藥物制備中的應用

無效

• 申請號: 201110283194.7
• 申請日: 2011-09-14
• 公開（公告）號: CN102988533A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 張俊清;廖小平;譚銀豐;蘇文琴
• 申請（專利權）人: 海南醫學院
• 主分類號: A61K36/74
• 分類號: A61K36/74;A61P29/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明涉及從咖啡廢渣中提取分離一種含三萜類成分的提取物及其在制備藥物方面的應用，屬藥學領域。

背景技術：

速溶咖啡廠在生產速溶咖啡的同時，產生了大量的咖啡廢渣，這些廢渣大多按垃圾處理。據美國農業部統計，全球每年有大約70億千克的咖啡產出，這些咖啡經食用或提取過后，產生的咖啡廢渣量極其可觀。隨著環保和低碳逐漸成為世界主流觀念，咖啡渣的廢物利用研究獲得了較大的進展，如日本和美國的科學家利用咖啡廢渣提煉生物柴油；另有文獻報道咖啡渣提取物具有抗氧化作用及可從咖啡廢渣中提取糖類物質，然而從咖啡廢渣中制備提取物用于抗炎，目前尚未見報道。研究表明，許多三萜類化合物具有明顯的抗炎作用，而咖啡廢渣中就含有大量三萜類物質。

本發明的目的就是要提供一種咖啡廢渣提取物，其含有三萜類物質，具有顯著的抗炎作用，可用于藥物制備方面的應用。

發明內容：

本發明所述的咖啡廢渣提取物，經過試驗篩選出最佳提取方法，經薄層色譜顯示其三萜類成分含量較高。在獲得該提取物后，經海南醫學院海南省熱帶藥用植物研究與開發重點實驗室對其進行了急性毒性試驗與抗炎藥效學試驗。

一、咖啡廢渣提取物的制備：

咖啡廢渣提取物用以下方法制備而成：取一定質量的咖啡廢渣，加入一定量的乙醇回流提取，收集提取液并濃縮成浸膏狀，得到咖啡渣提取物。

該咖啡廢渣提取物經顯色反應檢識和薄層鑒別顯示含有三萜類成分。

顯色反應：取提取物少量于試管內，用醋酐溶解，進行醋酐-濃硫酸顯色反應，結果：溶液最終呈紅色。

薄層色譜鑒別：展開劑∶石油醚-丙酮(4∶1)，結果：可見光下無斑點，噴10％硫酸乙醇溶液顯色，可見光下觀察到有四個斑點出現。

薄層色譜鑒別結果表明提取物中含有三萜類成分。

本發明咖啡廢渣提取物的制備方法最好是：取一定質量的咖啡廢渣，加入1～20倍量的乙醇回流提取1～3次，收集合并提取液并濃縮成浸膏狀，得到咖啡渣提取物。

制備咖啡廢渣提取物方法中乙醇濃度優選50％～95％，最好是用95％的乙醇；乙醇用量優選5～10倍量，最好為8倍量；提取時間最好為3小時；提取次數最好為2次。

二、急性毒性試驗

1.試驗材料：

SPF級昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22g；小鼠灌胃器；吐溫-80

2.試驗方法與結果：

取咖啡廢渣提取物，以吐溫-80為助溶劑，加水配成最大濃度混懸液(0.43g·ml^-1)。預試驗：取昆明種小鼠，雌雄各半，隨機分為3組，每組4只，禁食不禁水12h后，在一天內分別按8.60g·kg^-1、12.70g·kg^-1、17.20g·kg^-1灌胃給予咖啡廢渣提取物(每次灌胃體積0.2ml/10g，1天內最多給藥2次)，給藥后觀察小鼠生存狀態，連續觀察7天。結果見表1。

預實驗結果無法找出其100％致死劑量，正式試驗欲找出其最大耐受量。

正式試驗：取昆明種小鼠，雌雄各半，隨機分為3組，每組20只，禁食不禁水12h后，給藥組分別灌胃給予咖啡廢渣提取物8.60g·kg^-1、10.75g·kg^-1，對照組灌胃給予1％吐溫-80水溶液。觀察自主活動變化，連續觀察14天。結果見下表2.

表1急性毒性預試驗結果

表2急性毒性正式試驗結果

小鼠給藥后自主活動減少，偶有狂躁不安，給藥2天后，所有小鼠自主活動恢復正常。

以上試驗結果表明，咖啡廢渣提取物毒性較低，其小鼠的最大耐受量為8.60g·kg^-1。

三、抗炎藥效學試驗

1.抑制二甲苯致小鼠耳腫脹試驗。取咖啡廢渣提取物，以吐溫-80為助溶劑，加水配成不同濃度混懸液，

取18～22g昆明種白鼠50只，雌雄各半，每組10只，隨機分為咖啡廢渣提取物高、中、低劑量組、阿司匹林組、空白組共5組。每組分別灌胃給予相應藥物，每天一次，連續給藥7天。第7天給藥1h后，將二甲苯20μL均勻涂于小白鼠左耳兩面，右耳作為對照，至炎30min后，處死小鼠，沿耳廓線剪下兩耳，用直徑為8mm打孔器取左右耳片，隨即用電子天平稱重，以兩耳重量之差為腫脹度。采用t檢驗法比較各給藥組與對照組空白組差異。結果見表3.

腫脹率＝(左耳質量-右耳質量)/右耳質量×100％。