[發明專利]花生四烯酸及其生產和使用方法

無效

• 申請號: 201110282793.7
• 申請日: 1996-01-03
• 公開（公告）號: CN102399831A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: D·J·凱爾
• 申請（專利權）人: 馬泰克生物科學有限公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C11B1/00;C11B1/10;A23D9/02;A61K31/232;C12R1/645
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

本申請是中國專利申請200510071295.2，“花生四烯酸及其生產和使用方法”的分案申請。中國專利申請200510071295.2是國際申請PCT/US96/00182，國際申請日1996年1月3日，中國國家階段申請號96192002.5之同名申請的分案申請。

發明領域

本發明涉及花生四烯酸的生產，含有花生四烯酸的組合物及其用途。

發明背景

花生四烯酸(ARA)是ω6類長鏈聚不飽和脂肪酸(PUFA)(5，8，11，14-二十碳四烯酸，20∶4)。ARA是人體中含量最豐富的C₂₀PUFA。它主要存在于器官、肌肉和血液組織中，在血液、肝臟、肌肉和其它器官系統中作為主要與磷脂結合的結構脂類起著重要作用。除了主要的結構脂類作用之外，ARA還是許多循環二十烯酸衍生的生物活性物質(eicosenoid)，例如前列腺素E₂(PGE₂)，前列腺環素(PGI₂)，血栓烷A₂(T_xA₂)，和白細胞三烯leukotireneB₄(LTB₄)和C₄(LTC₄)的直接前體。這些eicosenoid具有對脂蛋白代謝，血液流變學，血管彈性，白細胞功能和血小板激活的調節作用。

盡管ARA對人體很重要，但是它不能在體內從頭合成。ARA是通過必需脂肪酸亞油酸(LOA)的延長和去飽和來合成的。該過程需要酶Δ6-去飽和酶的存在，該酶在人體內含量很低，Burre等，脂類(Lipids)，25：354-356(1990)。所以，大多數ARA必須靠飲食提供，這一點在身體的快速成長期，例如嬰兒期，尤為重要。

嬰兒在第一年中其體重可增至2至3倍。所以，需要大量的飲食ARA。為了滿足這一需要的增長，母乳中含有大量的ARA。Sanders等，美國臨床營養學雜志(Am.J.Clin.Nutr.)，31：805-813(1978)。ARA是母乳中主要的C₂₀PUFA。那些母乳喂養嬰兒的母親，尤其是素食主義者其嬰兒可以通過附加的飲食ARA獲益。但是，許多母親不進行母乳喂養，或者不在整個嬰兒快速成長期進行母乳喂養，而選擇使用嬰兒配方食物。

在本申請人所知的市售嬰兒配方食物中都不含甘油三酯形式的ARA。再次引用參考的US4,670,285(Clandinin等)揭示了嬰兒對包括ARA在內的脂肪酸的需求。為了提供這些脂肪酸，Clandinin等提出了一種蛋黃、魚油或血紅細胞磷酸酯和植物油的混合物，以此作為一種建議嬰兒配方食物。但是，魚油中含有大量的二十碳五烯酸(EPA)。已知EPA在嬰兒體內抑制ARA的合成。Carlson等，INFORM，1：306(1990)。所以，最好能夠提供ARA但不提供EPA。此外，蛋黃中的ARA含量較低，所以，Clandinin等的混合物在經濟上并不可行。

由于ARA存在于動物油而不是植物油中，其工業量的生產仍然是一個希望但困難的目標。Shinmen等在微生物技術(Microbiol.Biotech.)31：11-16(1989)中報道，利用常規的攪拌罐發酵，由一種分離出的真菌高山被孢霉(Mortierella?alpina)生產ARA。(參見Shinmen等的日本專利1,215,245)。在培養之后，收獲微生物，干燥后用有機溶劑從真菌生物質中萃取脂類，然后對脂類進行化學(共價)改性。例如，水解脂類混合物或將其轉化為醚酯，然后與環糊精混合，再用作食物補充。Shinmen等并沒有說明或建議使用未經改性的微生物脂類。

Porphyridium?cruentum，一種紅色的微藻，可以在池塘中大量種植，而且其脂含量中含有多至40％的ARA。Ahern等，生物技術與生物工程(Biotech.Bioeng)25：1057-1070(1983)。不巧的是，這些ARA主要與半乳糖脂結合，這是一種母乳中沒有的復合極性脂。這樣，不僅生成的可利用ARA僅占生物量的1％，而且ARA的形式如果不經改性不適合用作嬰兒配方食物的添加劑。