[發明專利]一種快速檢測BRCA1基因mRNA表達量的試劑盒無效
| 申請號： | 201110279225.1 | 申請日： | 2011-09-20 |
| 公開（公告）號： | CN102312002A | 公開（公告）日： | 2012-01-11 |
| 發明（設計）人： | 李艷;童永清 | 申請（專利權）人： | 李艷;童永清 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 汪俊鋒 |
| 地址： | 430060 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 檢測 brca1 基因 mrna 表達 試劑盒 | ||
1.一種快速檢測BRCA1基因?mRAN表達量的試劑盒，包含BRCA1基因引物，內參基因GAPDH引物和Taqman熒光探針：
BRCA1基因上游引物序列為：5’-?ATGGGCCCTTCACCAACA?-3’；?
BRCA1基因下游引物序列為：?5’-?CACAGAAGCACCACACAGCTGTA?-3’；
Taqman熒光探針：?6FAM?5’-?ATCAACTGGAATGGATG?-3’?TAMRA；
GAPDH基因上游引物序列為：5’-?ATGGAAATCCCATCACCATCTT?-3’；
GAPDH基因下游引物序列為：5’-?CGCCCCACTTGATTTTGG?-3’???；
Taqman熒光探針：6FAM?5’-?CAGGAGCGAGATCC-3’?TAMRA；
還包含：第一鏈cDNA合成試劑、陰性對照和陽性對照、PCR反應液、RNA提取試劑?。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，其中的第一鏈cDNA合成試劑為：25?mmol/L?MgC12?4μl，10×逆轉錄酶緩沖液2ul，10mmol/L?dNTP?2μl，RNA酶抑制劑0.5?μl，Oligo(dT)15?0.5μg，AMV逆轉錄酶15U，無RNase去離子水。
3.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，其中陰性對照和陽性對照：以去離子水為陰性對照，以含有BRCA1總RNA樣品為陽性對照。
4.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，其中的PCR反應液包括：10×PCR?反應混合液、0.25pmol/μl的引物、0.3pmol/μl的熒光探針、2.5~4.0mM的MgCl2、2U的Taq酶、0.2~0.4mM的dNTPs、0.2~1U的UNG酶、0.3~0.6mM?dUTP。
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