[發明專利]檢測氯霉素的酶聯免疫試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201110279098.5
• 申請日: 2011-09-20
• 公開（公告）號: CN103018451A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 何方洋;吳鵬;段盈盈;浦小容;李勇;崔廷婷;陳煒玲;齊向武
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征在于它含有：

(1)包被有包被原的酶標板；

(2)酶標記物；

(3)氯霉素標準品溶液；

(4)底物顯色液；

(5)終止液；

(6)濃縮洗滌液；

(7)濃縮復溶液，

所述包被原為氯霉素抗原、抗體或抗抗體，所述酶標記物為酶標記氯霉素抗原、酶標記氯霉素抗體或酶標記抗抗體，

當酶標板上包被抗原且酶標記物為酶標記抗抗體或酶標板上包被抗抗體且酶標記物為酶標記抗原時還含有氯霉素特異性抗體工作液。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述氯霉素抗原是由氯霉素半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述氯霉素抗體是由所述偶聯抗原制備獲得，其中所述氯霉素半抗原是將氯霉素分子結構中的硝基通過催化加氫反應得到的。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于所述載體蛋白為鼠血清蛋白、甲狀腺蛋白、牛血清蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或纖維蛋白原。

4.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于所述氯霉素抗體為單克隆抗體。

5.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于所用包被緩沖液為pH值為9.6，0.05mol/L的碳酸鹽緩沖液；所用封閉液為pH值為9.1～9.5，含有3％～10％小牛血清、0.2％吐溫-20、0.1～0.3mol/L的碳酸鹽緩沖液，所述百分比為重量體積百分比。

6.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于所述酶標記物的標記酶為辣根過氧化物酶或細菌提取堿性磷酸酯酶，當標記酶為辣根過氧化物酶時，底物顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲，底物顯色液B液為鄰苯二胺或四甲基聯苯胺，終止液為1～2mol/L的硫酸或鹽酸緩沖液；當標記酶為細菌提取堿性磷酸酯酶時，底物顯色液為對硝基磷酸鹽緩沖液，終止液為1～2mol/L氫氧化鈉。

7.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于所用濃縮洗滌液為pH值為7.1～7.5，含有0.8％～1.2％吐溫-20、0.01‰～0.03‰硫柳汞防腐劑、0.01～0.03mol/L的磷酸鹽緩沖液；所用濃縮復溶液為pH值為7.2～7.7，含有8％～12％卵清蛋白、0.1～0.4mol/L的磷酸鹽緩沖液，所述百分比為重量體積百分比。

8.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于氯霉素標準品溶液的濃度分別為0μg/L、0.025μg/L、0.075μg/L、0.3μg/L、1.2μg/L、4.8μg/L。

9.一種檢測樣品中氯霉素殘留的方法，包括步驟：

(1)樣品前處理；

(2)用權利要求1～8任一項所述的試劑盒進行檢測；

(3)分析檢測結果。