[發明專利]Cyclin D/CDK4來源的具有抗腫瘤活性的嵌合多肽以及作為抗腫瘤藥物的用途

無效

• 申請號: 201110277779.8
• 申請日: 2011-09-19
• 公開（公告）號: CN102321181A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 高艷鋒;王海麗;祁元明;陳艷平
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K38/10;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

技術領域

本發明涉及一種抗腫瘤多肽，尤其是涉及一種Cyclin?D/CDK4來源的具有抗腫瘤活性的嵌合多肽，本發明還涉及該嵌合多肽作為抗腫瘤藥物的用途。

背景技術

腫瘤的發生，實質上是一種細胞周期調控上的失衡，致使細胞呈現出失控樣生長，這個過程產生的生長因子、激素、各種蛋白以及遺傳物質DNA的代謝，都是通過細胞周期來實現和調控的。細胞周期調控有關的基因在腫瘤細胞對藥物的敏感性方面起著決定性的作用。細胞周期蛋白（cyclin）、周期蛋白依賴性激酶（CDK）和周期蛋白依賴性激酶抑制物（CKI）通過正負調控控制著整個細胞周期的正常運轉。cyclin和CDK過表達和活性異常增強，CKI表達缺失和檢測點異常都可能導致細胞周期紊亂而發生癌變。

cyclin?D是G1/S期轉換的重要正性調控因子，CDK4，即細胞周期素D依賴性激酶4，是細胞周期G1期重要的調控分子。CDK4蛋白能夠特異性地與cyclin?D結合形成復合物。cyclin?D/CDK4復合物可以使Rb蛋白的絲氨酸或蘇氨酸殘基發生磷酸化。已經證實cyclinD1是一種原癌基因，其基因結構和功能異常與多種腫瘤（如乳腺癌、食管癌、宮頸癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤等）的發生發展密切相關。cyclin?D2在胃癌、結直腸癌、骨肉癌、慢性B細胞淋巴細胞白血病等腫瘤中發現有異常表達。cyclin?D3幾乎在所有增生細胞中都有表達，并且在3種D型cyclin蛋白是表達最廣泛的一種。在胃癌、膀胱尿路上皮細胞癌、非霍奇金淋巴瘤等腫瘤中發現有高表達。

近來，蛋白－蛋白相互作用的特異性使得針對cyclin/CDK蛋白復合物結合區域的多肽片段成為新的高度選擇性藥物的來源。有關cyclin/CDK晶體結構的研究也很多，可以通過對晶體結構的研究來判定結合部位，研究者們開創了一種新的設計CDK抑制劑的方法，即設計出抑制復合物相互結合的抗腫瘤活性肽。但是許多腫瘤靶向的配基如多肽、抗體雖能靶向腫瘤組織或細胞，減少毒副作用，但卻缺乏穿透細胞膜的能力。目前介導生物大/小分子穿透細胞的方法主要是利用細胞穿膜肽(cell-penetrating?peptides,CPP)作為載體。經典的穿模肽HIV-Tat來源的PTD4的穿膜效率比HIV-Tat要高出許多，且多肽序列容易合成。PTD4與目的肽中間以Gly連接得到嵌合多肽，Gly連接兩條多肽即可保持兩條肽段的柔性，又不改變兩條肽段原有的二級結構。

發明內容

本發明的目的在于提供一種CyclinD/CDK4來源的具有抗腫瘤活性的嵌合多肽，本發明還提供該多肽作為抗腫瘤藥物的用途。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

本發明所述的Cyclin?D/CDK4來源的具有抗腫瘤活性的嵌合多肽，是基于Cyclin?D/CDK4復合物的多肽與載體穿模肽PTD4連接而成的PTD4-D1α5活性肽、PTD4-D3α5活性肽和PTD4-CDK4αC活性肽。

所述cyclin?D1來源的PTD4-D1α5活性肽的氨基酸序列為：Tyr-Ala-Arg-Ala-Ala-Ala-Arg-Gln-Ala-Arg-Ala-Gly-Arg-Pro-Glu-Glu-Leu-Leu-Gln-Met-Glu-Leu-Leu-Leu-Val-Asn-Lys。

所述cyclin?D3來源的PTD4-D3α5活性肽的氨基酸序列為：Tyr-Ala-Arg-Ala-Ala-Ala-Arg-Gln-Ala-Arg-Ala-Gly-Ala-Val-Ser-Pro-Arg-Gln-Leu-Arg-Asp-Trp-Glu-Val-Leu-Val-Leu-Gly-Lys。

所述CDK4來源的PTD4-CDK4αC活性肽的氨基酸序列為：Tyr-Ala-Arg-Ala-Ala-Ala-Arg-Gln-Ala-Arg-Ala-Gly-Leu-Pro-Ile-Ser-Thr-Val-Arg-Glu-Val-Ala-Leu-Leu-Arg-Arg-Leu-Glu-Ala-Phe。

本發明的嵌合多肽作為抗腫瘤藥物的用途。