[發明專利]一種高純度表沒食子兒茶素的制備方法

有效

• 申請號: 201110277582.4
• 申請日: 2011-09-19
• 公開（公告）號: CN102276571A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 龔雨順;楊志輝;劉仲華;黃建安
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然產物化學的技術領域，具體涉及一種從粗品茶多酚中制備高含量表沒食子兒茶素的方法。

背景技術

茶多酚是一種從綠茶中提取的多酚類成分，是茶葉中的主要活性成分。主要由沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate，EGCG)、表兒茶素沒食子酸酯(Epicatechin-3-gallate，ECG)、表沒食子兒茶素(Epigallocatechin，EGC)和表兒茶素(Epicatechin，EC)等組成。小葉種綠茶中EGCG和EGC含量較高，分別占4％和1％左右。

不同的茶兒茶素單體的生理活性存在一定差異，EGCG對于預防和治療惡性腫瘤、高血脂癥肥胖癥、神經退行性疾病等有良好作用；ECG具有良好的抗菌作用；EGC能刺激骨骼形成，幫助減緩骨骼老化。茶多酚中EGCG和ECG屬于酯型兒茶素，苦澀味較重，而EGC和EC屬于游離型兒茶素，味爽口不苦澀，這對于開發功能型茶飲料尤為重要。

目前文獻報道或專利公開的EGCG制備技術較多，但EGC的制備技術相對較少。主要包括制備型高效液相色譜法和高速逆流色譜法制備分離，屬于實驗室分離范疇，制備量通常只有數毫克，無法進行工業化生產。??公開號為CN101134941和CN101113411的專利介紹了一種誘導制備EGCG酯酶及用該酶生產EGC和沒食子酸的方法。該方法EGC轉化率和得率較高，適用于工業化大規模生產，但以米曲霉EGCG水解制備EGC的方法，水解后的EGC和沒食子酸還要進行進一步分離，制備成本較高。

發明內容

針對以上現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種從粗品茶多酚中提取純化出高含量EGC的方法。其核心技術是采用茶多酚為原料，經溶解、大孔吸附樹脂進行吸附、低濃度的脂肪醇洗脫、濃縮洗脫液、結晶、冷凍干燥，從而獲得高含量EGC，含量經高效液相色譜檢測可達到92-95％。

本發明目的通過以下技術方案實現：

1.取一定含量的茶多酚粗品，加適量純凈水作溶劑進行加熱提取，提取液過濾，殘渣棄去；

2.將溶解后的茶多酚溶液通過裝有非極性大孔吸附樹脂的層析柱；

3.用純凈水沖洗樹脂；

4.用低濃度的脂肪醇洗脫樹脂，當流出液有顏色變化時，開始收集流出液；

5.濃縮洗脫液，至濃縮液達到5-30％；

6.濃縮液在4℃的條件下放置24h，結晶；

7.將晶體用少量純凈水沖洗，過濾后采用冷凍干燥的方法進行干燥，得到粉末狀的EGC。

在一個實施方案中，步驟1中為茶多酚粗品為經乙酸乙酯萃取或聚酰胺樹脂進行吸附分離所獲得的小葉種綠茶提取物，所述純凈水體積為茶多酚粗品的1-20倍量(M∶V)，優選2-15倍，最優10倍。

在一個實施方案中，步驟2中為大孔吸附樹脂，優選美國羅門哈斯的Amberlite?XAD-2、日本三菱公司的HP-20和我國D101與AB-8。

在另一個實施方案中，步驟4中脂肪醇為C₁-C₃伯醇和仲醇，優選甲醇和乙醇。所述脂肪醇濃度為5-15％。所述脂肪醇洗脫體積為1-10倍柱體積，優選2-5倍柱體積，最優3倍柱體積。

技術效果：

1.采用柱層析分離技術，大大簡化了目前報道的各種工藝，操作簡單方便，同時生產成本低，利于工業化生產。

2.按照本發明提供的生產工藝生產出來的EGC含量經高效液相色譜檢測可達到92-95％，可以滿足現代功能食品、保健品等領域的市場需求，具有很好的市場優勢。

附圖說明

圖1粗品茶多酚高效液相色譜圖

圖2經純化后樣品中EGC高效液相色譜圖

具體實施方式

下面，本發明將用實施例進行進一步的說明，但是它并不限于這些實施例的任一個或類似實例。

實施例1