[發(fā)明專利]抗Aβ42肽的單克隆抗體及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110277484.0
• 申請日: 2011-09-19
• 公開（公告）號: CN102329393A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉慶煒
• 申請（專利權(quán)）人: 徐州逸仕生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N15/13;C12N15/63;C12N5/20;A61K39/395;A61P25/28;G01N33/577
• 代理公司: 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228
• 代理人: 張瑾

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。本發(fā)明涉及用于早期檢測和治療老年性癡呆(Alzheimer’sDisease.AD)的抗體。具體而言，本發(fā)明涉及抗老年癡呆癥主要靶蛋白Aβ42肽的單克隆抗體及其應(yīng)用。

發(fā)明背景

老年性癡呆(Alzheimer’s?Disease.AD)是一種漸進性神經(jīng)退化性疾病，其主要表現(xiàn)為記憶功能衰減及識別能力障礙，同時伴有各種神經(jīng)癥狀和行為障礙，具有非常高的發(fā)病率。自1907年德國醫(yī)生Alois?Alzheimer首次報道AD的癥狀和病理至今已近一個世紀，AD的確切致病機理仍無定論。

研究發(fā)現(xiàn)，AD的主要病理表現(xiàn)有腦內(nèi)細胞外的老年斑(senile?plaques)沉積、細胞內(nèi)的神經(jīng)原纖維纏結(jié)(neurofibrillary?tangles，NFT)以及膽堿功能缺損等，最終造成神經(jīng)元損傷和壞死并最終導致海綿腦病。1984年，Glenner和Wong(1984，Biochem?Biophys?Res?Commun，120(3)：885-890)發(fā)現(xiàn)老年斑的主要成分是一種由39至43個氨基酸殘基組成的具有折疊構(gòu)型的多肽，相對分子質(zhì)量約4200，稱為β-淀粉樣蛋白(β-amyloid，Aβ)。1992年，Hardy和Higgins(1992，Science，256(5054)：184-185)提出了“Aβ級聯(lián)假說(amyloid?cascade?hypothesis)”，認為Aβ的聚集和沉積能加劇神經(jīng)原纖維的纏結(jié)，并導致細胞死亡，是AD形成的最主要原因。Aβ沉積發(fā)生在AD早期，且與正常大腦相比，AD患者大腦中的Aβ沉積更為嚴重和廣泛，而Aβ本身能引起氧化應(yīng)激、細胞凋亡以及軸突生長異常等神經(jīng)病理學變化，提示Aβ在AD的產(chǎn)生與發(fā)展中具有重要作用。Aβ沉積主要集中在小膠質(zhì)細胞周圍，并刺激小膠質(zhì)細胞釋放炎癥因子，發(fā)生炎癥反應(yīng)，這種慢性炎癥反應(yīng)能夠引起細胞的裂解并釋放具有反應(yīng)活性的氧化性物質(zhì)，從而削弱了吞噬細胞的吞噬作用，這樣更加劇了Aβ的沉積。

A?β蛋白在大腦內(nèi)積聚形成纖維和斑塊(俗稱老年斑)，造成神經(jīng)元損傷和壞死并最終導致海綿腦病。Aβ是淀粉樣前體蛋白(amyloid?precursor?protein，APP)正常代謝的產(chǎn)物之一。APP基因位于人類第21號染色體長臂，由至少18個外顯子編碼，Aβ的編碼序列位于第16、17個外顯子。APP主要有兩條代謝途徑：一是α-分泌酶在687與688氨基酸之間切割，將APP氨基末端671個氨基酸的可溶性多肽sAPPα釋放到胞外，由于切割位點在Aβ序列內(nèi)，因此不產(chǎn)生完整的Aβ片段；另一條途徑是經(jīng)β-分泌酶在671與672氨基酸之間切割，然后由g-分泌酶在APP的跨膜區(qū)切割，釋放出Aβ40、Aβ42、Aβ43，正常情況下多數(shù)為Aβ40(90％)，只有少量Aβ42和Aβ43產(chǎn)生。Wiltfang等(2007，Journal?ofNeurochemistry，101(4)：1053-1059)發(fā)現(xiàn)，Aβ40肽和Aβ42肽的比例失調(diào)，是造成老年癡呆的重要原因之一。

APP的代謝和Aβ的產(chǎn)生受到多種因素的調(diào)節(jié)。對早期發(fā)病AD的遺傳學研究發(fā)現(xiàn)，大部分AD與第21號染色體上的APP基因突變相關(guān)，為揭示Aβ和APP在AD病理發(fā)展中的作用提供了強有力的證據(jù)。AD突變位于APP的第670和671密碼子，能增強β-分泌酶的活性。突變位于APP的第612個密碼子，能抑制α-分泌酶的剪切活性。這兩種突變的結(jié)果使更多的APP由β-分泌酶途徑代謝，產(chǎn)生大量的Aβ。