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[發明專利]從煙草克隆細胞色素P450基因無效

專利信息
申請號: 201110277033.7 申請日: 2004-10-15
公開(公告)號: CN102321641A 公開(公告)日: 2012-01-18
發明(設計)人: D.徐 申請(專利權)人: 美國無煙煙草有限責任公司
主分類號: C12N15/53 分類號: C12N15/53;C12N15/82;C12Q1/68;A01H5/00
代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105 代理人: 封新琴
地址: 美國弗*** 國省代碼: 美國;US
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 煙草 克隆 細胞 色素 p450 基因
【權利要求書】:

1.一種分離的煙草核酸分子,該核酸分子含有選自SEQ.ID.No.:299-357的核酸序列。

2.一種轉基因植物,該轉基因植物含有如權利要求1所述的核酸分子。

3.如權利要求2所述的轉基因植物,其特征在于,所述植物是煙草植物。

4.一種產生轉基因植物的方法,該方法包括以下步驟:

(i)將如權利要求1所述的核酸分子與在所述植物中具有功能的啟動子操作性相連以產生植物轉化載體;

(ii)用步驟的所述植物轉化載體轉化所述植物;

(iii)選擇用所述轉化載體轉化的植物細胞;和

(iv)從所述轉化的植物細胞再生轉化植物。

5.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述核酸分子處于反義方向。

6.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述核酸分子處于有義方向。

7.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述核酸分子處于RNA干擾方向。

8.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述核酸分子表達為雙鏈RNA分子。

9.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述雙鏈RNA分子長度為約15-25個核苷酸。

10.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述轉基因植物是煙草植物。

11.一種選擇含有核酸分子的植物的方法,其中分析所述植物中是否存在選自299-357的核酸序列。

12.如權利要求11所述選擇植物的方法,其特征在于,通過DNA雜交分析所述植物。

13.如權利要求11所述選擇植物的方法,其特征在于,所述DNA雜交是Southern印跡分析。

14.如權利要求11所述選擇植物的方法,其特征在于,所述DNA雜交是Northern印跡分析。

15.如權利要求11所述選擇植物的方法,其特征在于,通過PCR檢測分析所述植物。

16.如權利要求11所述選擇植物的方法,其特征在于,所述植物是煙草植物。

17.一種增加或降低植物中降煙堿水平的方法,所述方法包括以下步驟:

(i)將如權利要求1所述的核酸分子與在所述植物中具有功能的啟動子操作性相連以產生植物轉化載體;

(ii)用步驟(i)所述植物轉化載體轉化所述植物;

(iii)選擇用所述轉化載體轉化的植物細胞;和

(iv)從所述轉化的植物細胞再生轉化植物。

18.如權利要求17所述的方法,其特征在于,所述核酸分子處于反義方向。

19.如權利要求17所述的方法,其特征在于,所述核酸分子處于有義方向。

20.如權利要求17所述的方法,其特征在于,所述核酸分子處于RNA干擾方向。

21.如權利要求17所述的方法,其特征在于,所述核酸分子表達為雙鏈RNA分子。

22.如權利要求17所述的方法,其特征在于,所述轉基因植物是煙草植物。

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