[發明專利]一種飼用果膠酶PLA及其基因和應用有效

申請號：	201110275025.9	申請日：	2011-09-16
公開（公告）號：	CN102296054A	公開（公告）日：	2011-12-28
發明（設計）人：	黃輝;謝寧;湯海鷗;王海燕;王曉睿	申請（專利權）人：	北京挑戰生物技術有限公司
主分類號：	C12N9/26	分類號：	C12N9/26;C12N15/56;C12N15/63;C12N15/81;C12N1/15;C12N1/19;C12N15/80;A23K1/165;C12R1/84
代理公司：	北京法思騰知識產權代理有限公司 11318	代理人：	高宇;楊小蓉
地址：	100081 北***	國省代碼：	北京;11
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種果膠酶 pla 及其基因應用
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及基因工程領域，具體地，本發明涉及一種飼用果膠酶PLA及其基因和應用。

背景技術

果膠主要是直鏈α-1，4糖苷鍵連接的D-半乳糖醛酸殘基組成的復合多糖，是植物細胞壁和中膠層的重要組成部分(van?Buren?JP.Academic?Press，1991.p.1-22)。果膠酶(pectinases)是分解果膠質的多種酶的總稱，廣泛存在于高等植物和微生物中，通常動物細胞不能合成這類酶。根據分解糖苷鍵的反應性質或降解底物的性質可以分為：果膠裂解酶(pectin?lyases，PL)、果膠水解酶(pectin?hydrolases)、果膠酯酶(pectin?esterases，PE)和原果膠酶(Alkorta?I，et?al.Process?Biochem?1998，33：21-28)。果膠酶按其作用最適pH分為酸性果膠酶和堿性果膠酶。

果膠酶是世界五大商品酶之一，堿性果膠酶在紡織行業上的棉麻脫膠應用方面效果顯著，使產品質量有所提高，同時降低或不用化學品在棉麻脫膠工藝的應用，減少了對環境的污染等。酸性果膠酶的最適作用pH在偏酸性范圍，主要用于食品行業的水果榨汁和果汁澄清，降低葡萄酒粘度。酸性果膠酶在飼料行業有重大的應用價值。目前畜禽常規日糧組成中，植物性原料占有非常大的比例，其中富含大量果膠的植物細胞壁成分成為了限制植物性原料利用的首要因素，直接影響著動物對植物性飼料原料中養分的利用率，因此，研究果膠和果膠酶各組分的性質，有利于新型綠色酶制劑的開發和利用，進而對提高飼料利用率、改善粗飼料營養價值、節約飼料資源、降低生產成本具有重要意義。但目前飼料用酶制劑的研究多集中在纖維素酶、半纖維素和淀粉酶上，對飼用果膠酶并沒有進行深入的研究。飼料用酶果膠酶的作用環境是動物的胃腸道，這就要求優良的飼料用果膠酶的在酸性和中性及37-40℃范圍內均能維持高活性，這樣酶的作用時間最長，能最高地發揮其效率。

目前作為工業應用的果膠酶都是從微生物(細菌，真菌和酵母菌)中得到的。很多果膠酶已被純化并進行了性質測定(Niture?SK.Biologia?2008，63：1-19；Niture?SK.Biologia?2008，63：1-19；Alkorta?et?al.Process?Biochem?1998，33：21-28)。一些果膠酶素基因已被克隆，測序和并進行了表達(Mertens?et?al.Fungal?Genet?Biol?2008；45：1616-1624)，但很多酶的性質特征，均存在一些缺陷，例如，pH或溫度作用范圍不合適，表達量低等，不能滿足實際應用的需要。因此人們希望能夠找到一種新的能夠滿足實際應用需求的果膠酶，從而能夠進一步推廣該果膠酶的應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種新的飼用果膠酶PLA。

本發明的另一目的是提供編碼上述飼用果膠酶的基因。

本發明的另一目的是提供包含上述飼用果膠酶基因的重組載體。

本發明的另一目的是提供包含上述飼用果膠酶基因的重組菌株。

本發明的另一目的是提供制備上述飼用果膠酶的方法。

本發明的另一目的是提供上述飼用果膠酶的應用。

本發明提供了一種飼用果膠酶PLA，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示：

MIRSHLLRLS?TRAFAGALLL?SPLSAMADHV?AEKMLRLQTA

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