[發明專利]一種植物和土壤線蟲的氯化鉀浮選方法

有效

• 申請號: 201110267841.5
• 申請日: 2011-09-09
• 公開（公告）號: CN102357423A
• 公開（公告）日: 2012-02-22
• 發明（設計）人: 王云彪;吳東輝;武海濤;宋理洪
• 申請（專利權）人: 中國科學院東北地理與農業生態研究所
• 主分類號: B03D1/00
• 分類號: B03D1/00;G01N1/34
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 韓末洙

技術領域

本發明涉及一種植物和土壤線蟲的浮選方法，具體涉及氯化鉀浮選方法。

背景技術

線蟲為地球上數量最大的動物類群，根據其生長介質分為植物線蟲、動物線蟲等。在 生物學、地理學和環境科學領域被廣泛研究。對生態系統中的線蟲分離是線蟲研究的最基 本環節，也是至關重要環節。獲取足量線蟲是進行研究的根本保障。目前，土壤線蟲的分 離方法主要采用蔗糖離心浮選法、貝爾曼漏斗法和淺盤法。

貝爾曼漏斗法和淺盤法只可用于活蟲的分離，分離效率低于蔗糖離心浮選法。蔗糖離 心浮選法是將含線蟲的植物或土樣用水攪勻后離心，將沉淀用蔗糖溶液攪勻，再離心、沉 淀，過篩沖洗；該法可對含死亡線蟲的長期保存樣品進行分離，不受采樣時間和操作受室 溫高低的限制，是線蟲分離最為常用的方法。但蔗糖離心浮選法步驟繁瑣，用時較長，工 作量大，耗水耗能。作為線蟲研究的基礎，便捷、高效且省時節能的獲取足量線蟲的方法 有待探究。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有植物和土壤線蟲的蔗糖離心浮選法步驟繁瑣，用時較長， 工作量大，耗水耗能的問題，本發明提供了一種植物和土壤線蟲的氯化鉀浮選方法。

本發明的植物和土壤線蟲的氯化鉀浮選方法是通過以下步驟實現的：一、稱取植物或 土壤樣品，然后加入濃度為5mol/L的氯化鉀溶液中攪拌5～20min，得懸濁液，其中，氯化鉀 溶液與植物或土壤樣品的質量比為5～10∶1；二、將步驟一得到的懸濁液靜置沉淀30～60min， 得上清液和沉淀物；三、將步驟二得到的沉淀物代替步驟一中的植物或土壤樣品，按步驟 一和步驟二的方法重復操作2～5次，然后棄去沉淀物，得到3～6份上清液；四、將步驟三得 到的3～6份上清液合并，然后注入套在一起的80目和500目的網篩，再用水反洗500目網篩， 得線蟲，完成植物和土壤線蟲的氯化鉀浮選方法。

本發明步驟三中將合并的上清液注入網篩時只要避免上清液濺出即可。

本發明的有益效果是：本發明直接采用了高濃度氯化鉀溶液(5mol/L)浮選線蟲，避 免了繁瑣的離心程序以及繁重的工作量，大大節省了植物或土壤樣品水洗的用水和離心用 電，并將分離時間縮短為1.5小時～6小時；解決了蔗糖離心浮選法中兩次離心和兩次沉 淀產生的線蟲損傷問題；將體積與含水量不同的樣品進行相同比例的鹽液處理，減少了干 擾因素，保證線蟲樣品采集的系統誤差，保證分離效率的同時還提高了分離結果的精確度。

本發明的氯化鉀浮選方法與傳統蔗糖分離方法相比，工作量減少了4/5，工作時間減少 了70％～90％，工作成本降低了2/3。經過對測試結果的統計檢驗表明，本方法與蔗糖離心浮 選法的分離效率無明顯差異。本發明在科研工作中進行了應用，通過對國家自然科學基金 “秀麗隱桿線蟲HSPs對重金屬脅迫的響應機制”的研究中進行的實際檢測，取得了較好的 技術效果。

具體實施方式

本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意 組合。

具體實施方式一：本實施方式為植物和土壤線蟲的氯化鉀浮選方法是通過以下步驟實 現的：一、稱取植物或土壤樣品，然后加入濃度為5mol/L的氯化鉀溶液中攪拌5～20min， 得懸濁液，其中，氯化鉀溶液與植物或土壤樣品的質量比為5～10∶1；二、將步驟一得到 的懸濁液靜置沉淀30～60min，得上清液和沉淀物；三、將步驟二得到的沉淀物代替步驟 一中的植物或土壤樣品，按步驟一和步驟二的方法重復操作2～5次，然后棄去沉淀物， 得到3～6份上清液；四、將步驟三得到的3～6份上清液合并，然后注入套在一起的80目 和500目的網篩，再用水反洗500目網篩，得線蟲，完成植物和土壤線蟲的氯化鉀浮選方 法。

本實施方式的有益效果是：本發明直接采用了高濃度氯化鉀溶液(5mol/L)浮選線蟲， 避免了繁瑣的離心程序以及繁重的工作量，大大節省了植物或土壤樣品水洗的用水和離心 用電，并將分離時間由2天縮短為2小時；解決了蔗糖離心浮選法中兩次離心和兩次沉淀 產生的線蟲損傷問題；將體積與含水量不同的樣品進行相同比例的鹽液處理，減少了干擾 因素，保證線蟲樣品采集的系統誤差，保證分離效率的同時還提高了分離結果的精確度。