[發明專利]皂苷化合物及其制備方法與在制備免疫佐劑中的應用

有效

• 申請號: 201110267032.4
• 申請日: 2011-11-09
• 公開（公告）號: CN102382154A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 張衛東;俞飚;單磊;孫建松;蘇娟;曹文杰;沈云亨;田均勉
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學;中國科學院上海有機化學研究所
• 主分類號: C07H15/256
• 分類號: C07H15/256;C07H1/08;C07H1/00;C07J63/00;A61K31/704;A61P37/04
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 王巍

1.一種皂苷化合物，其特征在于，所述化合物包括金鐵鎖皂苷B和金鐵鎖皂苷C，以下列結構式表示：

金鐵鎖皂苷B

金鐵鎖皂苷C

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2.一種如權利要求1所述皂苷化合物的制備方法，其特征在于，該方法包括下列步驟：

(1)金鐵鎖干燥根，粉碎后80％乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，減壓濃縮得浸膏無醇味，浸膏kg用純水L按1∶10的比例稀釋后，過大孔樹脂柱HP-20，分別用純水，70％乙醇，丙酮依次洗脫；取70％乙醇洗脫部位為總皂苷，該總皂苷部位過C-18反相鍵合硅膠柱劃段，用純水，30％乙醇，70％乙醇，90％乙醇依次洗脫，共分為四個洗脫部分S1-S4；取S4段過硅膠柱，以甲醇-乙酸乙酯1∶1洗脫分為3部分S6-1，S6-2和S6-3，按照薄層板上斑點的Rf值對斑點依次收集劃斷，薄層板色譜展開劑為甲醇-乙酸乙酯1∶1體積比，20％硫酸顯色顯色劑；取S6-2部分經過C-18反相鍵合硅膠柱，依次用40％，60％，80％和純甲醇洗脫，得到4個洗脫部分S6-2-a，S6-2-b，S6-2-c和S6-2-d，按照薄層板上斑點的Rf值依次收集劃斷，薄層板色譜展開劑為甲醇∶水1∶1體積比，20％硫酸顯色顯色劑；取S6-2-c過凝膠柱，用甲醇作流動相洗脫，最后分離到1個化合物金鐵鎖皂苷A，其化學結構以下式表示：：

金鐵鎖皂苷A

上式中：Glc：D-葡萄糖

????????Gal：D-半乳糖

????????Xyl：D-木糖

????????Fuc：夫糖

????????Rha：鼠李糖?????????????????????????????????????；

(2)制備金鐵鎖皂苷B和金鐵鎖皂苷C：

i、NaOH水解金鐵鎖皂苷A中葡萄糖醛酸上羧基所連的正丁醇鏈：向Cp0的THF溶液中加入NaOH溶液，在室溫條件下攪拌過夜，然后，混合物用酸性樹脂Dowex?Resin?H⁺form中和后過濾，濾液蒸干后過Sephadex?LH-20柱，用甲醇洗脫，得到水解產物TS1：

ii、葡萄糖醛酸的羧基上接上不同的脂肪胺鏈或醚鏈：分別向上述步驟i水解產物TS1的DMF溶液中加入正己胺和1-氨基四甘醇單甲醚，于1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽，HOBt和DIEA中，在室溫條件下反應攪拌過夜，然后減壓濃縮至干，兩個反應產物分別過C-18反相鍵合硅膠柱ODS，各用40％，50％和60％的甲醇溶液梯度洗脫得到金鐵鎖皂苷B和金鐵鎖皂苷C：

3.一種如權利要求1所述皂苷化合物在制備免疫佐劑中的應用。

4.根據權利要求3所述應用，其特征在于，所述皂苷化合物為金鐵鎖皂苷B或金鐵鎖皂苷C。

5.根據權利要求3所述應用，其特征在于，所述免疫佐劑是由金鐵鎖皂苷B作為活性成分與藥用載體組成的藥物組合物。

6.根據權利要求3所述應用，其特征在于，所述免疫佐劑是由或金鐵鎖皂苷C作為活性成分與藥用載體組成的藥物組合物。

7.根據權利要求3所述應用，其特征在于，所述免疫佐劑中，皂苷化合物的量為5μg-1000μg/單劑量。

8.根據權利要求7所述應用，其特征在于，所述免疫佐劑中，皂苷化合物的量為10-50μg/單劑量。