[發明專利]人工輔助授粉培育彩色馬蹄蓮新品種的方法

有效

• 申請號: 201110266699.2
• 申請日: 2011-09-09
• 公開（公告）號: CN102379239A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 吳麗芳;崔光芬;王繼華;王祥寧;賈文杰;馬璐琳;段青
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院花卉研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01C1/00;A01G1/00;A01H4/00
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

1.一種人工輔助授粉培育彩色馬蹄蓮新品種的方法，其特征在于經過下列各步驟：

A．分別選出4～5cm的彩色馬蹄蓮種球，作為母本和父本進行種植；

B．在步驟A的彩色馬蹄蓮母本植株長至佛焰苞剛展開且雄蕊尚未吐花粉時，切去花燭上部雄花，待雌花柱頭分泌出粘液時，從步驟A的父本種植植株上采集雄花當天吐出的花粉，對雌花柱頭進行人工授粉；

C．將步驟B授粉植株的佛焰苞剪至只留下2～3cm基部，或者將整個佛焰苞向后翻卷，以露出雌花，之后將雌花套袋5～7天，去除套袋后，繼續生長至植株枯萎倒伏且果穗變黃；

D．采收步驟C的果實，并將果實內種子脫粒后，在8～12℃溫度下貯藏到次年的2～3月份，取出，依次用100mg/L的NaOH以及50～100mg/L的赤霉素分別浸種20～30分鐘后，將種子播種在泥炭基質中培育實生苗，其間保持基質濕潤；

?E．待步驟D的種子苗長到高度為4～5cm，并具有3～4片真葉時，移栽到大棚內的種植基質中，種植基質體積比為紅土:腐殖土=1:1，并控制種植密度為20cm×20～25cm，生長期間按常規方法管理，直至植株枯黃，清除枯葉，讓種球在田間自然條件下留地至下一年開春；

F．開春時對留地種球進行澆水，生長期間按常規方法管理，直至種球萌芽，并在6～7月份開花，從開花植株中篩選優良單株，而未開花植株繼續生長至秋天休眠后，清除枯葉，種球留地自然移冬，待下一年開春時，對留地種球澆水，并按常規管理至種球萌芽，并在6～7月份開花，繼續從開花植株中篩選優良單株，未入選后代淘汰；

G．待步驟F選出的優良單株葉片完全枯黃時，挖取種球，并將種球于溫度為20～25℃，濕度為70～80%的條件下催芽，直至芽長至0.5cm以上時，取0.5～1.0cm²的帶芽組織塊，進行洗滌和消毒；

H．將步驟G的消毒后帶芽組織塊接種到MS＋BA2.0～4.0mg/L＋GA0.2mg/L+瓊脂6.5g/L+白糖30g/L的誘導培養基中，培養50天后，得到叢狀芽，將叢狀芽分切后轉接在MS＋BA0.5～1.0mg/L+NAA0.5mg/L+瓊脂6.5g/L+白糖30g/L的繼代培養基中，每20～30天繼代培養一次，待苗高3～4cm時將單株苗接種在MS＋NAA0.3+IAA0.2+瓊脂6.5g/L+白糖30g/L的生根培養基中，培養20天后獲得優株組培苗，出瓶移栽種植，生長期間按常規方法管理，直至開花，即得到彩色馬蹄蓮新品種。

2.如權利要求1所述的人工輔助授粉培育彩色馬蹄蓮新品種的方法，其特征在于所述步驟E、F、H的常規管理方法是：澆水做到間干間濕，種植的前1個月保持基質濕潤，待植株開始休眠時減少澆水，葉片開始變黃后停止澆水；在定植前20天用遮光率為60%的遮陰網遮蓋，之后逐步增加光照強度，2個月后解除遮陰；每月噴施質量濃度為0.3～0.5%的復合肥溶液一次；用稀釋600～800倍的農用鏈霉素溶液和蔬爾壯每月交替灌根。

3.如權利要求1所述的人工輔助授粉培育彩色馬蹄蓮新品種的方法，其特征在于所述步驟F的篩選優良單株是：選擇花色純正、葉色綠、長勢好、不感病、產量高的單株。

4.如權利要求1所述的人工輔助授粉培育彩色馬蹄蓮新品種的方法，其特征在于所述步驟G中的洗滌和消毒是：用適量常規洗滌劑清洗帶芽組織塊后，用清水漂凈，在質量濃度為0.15～0.2%的升汞溶液中消毒40鐘,再在質量濃度為2～3%的次氯酸鈉溶液中消毒20～30分鐘,再用無菌水漂洗3次。

5.如權利要求1所述的人工輔助授粉培育彩色馬蹄蓮新品種的方法，其特征在于所述步驟H中的誘導、繼代和生根培養條件是：溫度為24～26℃、光照強度為2000～2500Lx、光照時間為8～10小時/天。