[發(fā)明專利]一種高含量EGCG的精制提純方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110266483.6
• 申請日: 2011-09-09
• 公開（公告）號: CN102311419A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許育海;嚴(yán)紹華;李威;李選民
• 申請（專利權(quán)）人: 四川天予植物藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高含量EGCG的精制提純方法,屬于天然產(chǎn)物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

EGCG,即表沒食子兒茶素沒食子酸酯，結(jié)構(gòu)式見圖-1，是從綠茶中提取精制而得。綠茶茶多酚的主要成分是兒茶素。其中又包括表兒茶素（EC）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）等，而EGCG約占兒茶素總量的50％。研究表明EGCG具有較強(qiáng)的抗氧化性和預(yù)防癌癥及心血管疾病的功能，并可以提高癌細(xì)胞對化療的敏感性，同時降低化療對心臟的毒性。據(jù)文獻(xiàn)資料顯示，EGCG在治療癌癥，修復(fù)DNA、抗腫瘤等方面有較強(qiáng)的藥理作用，能夠增強(qiáng)免疫系統(tǒng)的功能，抑制肝脂和膽固醇的增長，抑制腫瘤的生長，對痢疾傷害、金黃色葡萄球菌也有極強(qiáng)的抑制作用。目前EGCG主要應(yīng)用于食品添加劑、保健品等產(chǎn)品。

圖-1

由于從綠茶中提取出來的多酚類物質(zhì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)都極其相似，都具有強(qiáng)極性，一般的分離方法都很難將其分開。

目前從茶多酚中直接提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯單體的方法主要有柱層析法、高速逆流分配色譜法、離子反應(yīng)法，乙酰化法等。現(xiàn)有專利報(bào)道的柱層析法如CN1465572、CN1470510A都是先經(jīng)過繁瑣的前處理方法去除大部分雜質(zhì)，再上葡聚糖SephadexLH-20柱提純；CN101386614A、CN101723927A等經(jīng)過多次使用不同吸附劑進(jìn)行層析以達(dá)到提純目的。專利CN1367171A是通過多次逆流萃取后，通過調(diào)整PH值后加二價（三價）金屬鹽進(jìn)行離子反應(yīng)，得到沉淀物經(jīng)過洗滌、酸溶，萃取、脫酸、濃縮、重結(jié)晶等一系列步驟最終得到EGCG含量達(dá)?90%。專利CN1733753是通過用惰性氣體飽和的去離子水溶解茶多酚樣品、膜濾、上柱等達(dá)到精制提純的。專利CN10182319A利用茶多酚上的酚羥基乙酰化后過硅膠柱，再脫乙酰化的,乙酰化反應(yīng)需要在冰浴上進(jìn)行，反應(yīng)完成還需大量冰水，且反應(yīng)時間長，此法只適用于實(shí)驗(yàn)室制備。由于反應(yīng)條件特殊，操作繁瑣，耗時長等缺點(diǎn)，無法在大生產(chǎn)上推廣使用。專利CN1277068A介紹了一種高純度單體兒茶素的高速逆流分配色法，目前逆流色譜技術(shù)一次分離樣品的量小，分離周期長，難以應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。專利CN1724530A公開了一種連續(xù)中壓柱層析制備高純度EGCG的方法，此法只適合對EGCG含量大于50%的茶多酚進(jìn)行提純，收率達(dá)到70%左右。

綜上所述，以上提純方法雖可以達(dá)到EGCG高含量的要求，但其尚存在許多問題。為解決這些問題，本發(fā)明開發(fā)出了一種操作簡單，節(jié)能，收率高的提純方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明將提供一種從茶多酚中提取高含量EGCG的精制方法。以低含量的茶多酚為原料，經(jīng)溶解、上柱、洗脫、濃縮、精制，干燥而得。該方法所制得的EGCG為白色粉末，HPLC檢測，含量≥98％。

本發(fā)明所述的以低含量茶多酚為原料，是指茶多酚EGCG含量在40～50％的綠茶提取物。

本發(fā)明所述的從茶多酚中提取高含量EGCG的精制方法，包括以下主要操作步驟：

a.?按1:3～1:8（m/m）的茶多酚與硅膠的重量比對茶多酚進(jìn)行硅膠柱層析。

b.?按4:6:1～5:5:1比例的乙酸乙酯－石油醚－乙酸混合溶劑進(jìn)行洗脫，分別收集各洗脫液。

c.?以薄層層析確定b步驟中收集的EGCG洗脫液,并將其高純度洗脫液合并濃縮，得EGCG浸膏。

d.?按1:6～10（m/v）比例向該固體中加入60～90％乙醇，50℃～70℃水浴中加入攪拌2～3小時，放置過夜結(jié)晶，過濾，收集晶體，80℃減壓干燥，得高含量EGCG。

其中步驟a、b所述的柱層析條件為：硅膠規(guī)格為60～100目。

???本發(fā)明所提供的高含量EGCG的精制方法，所得產(chǎn)品含量≥98％，收率≥80％。

具體實(shí)施方式:

以下實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但是所述實(shí)施例并不代表是本發(fā)明的唯一途徑，也不意味著對本發(fā)明作任何限制。