[發(fā)明專利]一種高純度鞣花酸的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110264272.9
• 申請日: 2011-09-08
• 公開（公告）號: CN102276618A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉東鋒;吳艷波
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/06
• 分類號: C07D493/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高純度鞣花酸的制備方法，具體涉及一種應(yīng)用柱分離以及快速的高效液相制備的方法。

背景技術(shù)

鞣花酸（英文名：ellagic?acid，化學(xué)名：2，3，7，8-tetrahydroxy?benzopyrano-5，4，3-cde?benzopyran-5，10-dione），也是一種植物多酚類化合物，廣泛存在于各種自然界的軟果、堅(jiān)果等植物果實(shí)中。它對化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)癌變及其他多種癌變有明顯的抑制作用。從機(jī)理上講，本品是一種抗氧化劑，它能與人體內(nèi)有害自由基結(jié)合，具有強(qiáng)力去癌變功效，可以抗衰老、增加機(jī)體免疫，還具有降壓、鎮(zhèn)靜作用，對多種細(xì)菌、病毒有很好的抑制作用。因此本品有“克癌之星”、“致癌物清除劑”之美稱。它可作為保健食品添加劑，研究、開發(fā)本品具有較高的經(jīng)濟(jì)價值和廣泛的應(yīng)用范圍。目前歐美等國需求量很大，因此本品的開發(fā)有重要意義。

鞣花酸是沒食子酸的二聚衍生物，是一種多酚二內(nèi)酯，呈反式?jīng)]食子酸單寧結(jié)構(gòu)。純鞣花酸是一種黃色針狀晶體，熔點(diǎn)(吡啶)大于360℃，微溶于水、醇，溶于堿、吡啶，不溶于醚。分子式為C₁₄H₆O₈。

目前，高效液相制備色譜用于大規(guī)模制備高含量的鞣花酸的工作還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高純度鞣花酸的制備方法，該方法能實(shí)現(xiàn)高純度鞣花酸的制備。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種高純度鞣花酸的制備方法，其特征在于包括如下步驟：將五倍子藥材粉碎，用含堿乙醇水溶液提取2-4次，每次1-3h，抽濾，合并濾液，減壓濃縮無醇，分散于水中，分散液先通過大孔樹脂柱，用水洗至中性，洗液棄去，再用洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、干燥得粉末，再采用制備型高效液相色譜進(jìn)行分離制備高純度的鞣花酸，經(jīng)HPLC測定產(chǎn)品鞣花酸的含量為98%以上。

所述含堿乙醇水溶液體積百分比為60-80%，采用氫氧化鈉或碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH為8~9。

所述提取方法為微波輔助提取、加熱回流提取或超聲提取中的一種。

所述大孔樹脂型號可選AB-8、LSA-21、HPD-400等。

所述洗脫劑為50-80%乙醇，采用鹽酸調(diào)節(jié)pH3-5。

所述制備型高效液相色譜條件為：以反相鍵合硅膠為固定相，以乙腈-1%三氟乙酸（52~65：35~48）為流動相，。

本發(fā)明的有益效果在于：

（1）本發(fā)明整體工藝操作簡單，可行性強(qiáng)；

（2）本發(fā)明以制備型高效液相為分離手段，可以獲得純度在98%以上的鞣花酸，且單針分離時間短，非常適合大批量的制備，同時制備溶劑可回收利用，可實(shí)現(xiàn)批量制備；

（3）本發(fā)明在制備高效液相色譜前先用大孔樹脂除雜，可延長色譜柱的使用壽命。

現(xiàn)結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，實(shí)施例僅限于說明本發(fā)明，而非對本發(fā)明的限定。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

將五倍子藥材粉碎，取1kg，用80%乙醇水溶液（氫氧化鈉調(diào)堿至pH8）加熱回流提取4次，每次1h，抽濾，合并濾液，減壓濃縮無醇，分散于水中，分散液先通過LSA-21大孔樹脂柱，用水洗至中性，洗液棄去，再用4L60%乙醇（鹽酸調(diào)節(jié)pH3）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成濃度為50mg/ml的溶液，經(jīng)0.45μm微濾膜過濾，制備型高效液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為25ml，以乙腈-1%三氟乙酸（52：48）為流動相，控制流速為50ml/min，紫外檢測器監(jiān)測設(shè)定為254nm，在線檢測，收集含有鞣花酸的高純度流分，濃縮至干即得含量為98.4%的鞣花酸。

實(shí)施例2：

將五倍子藥材粉碎，取1kg，用70%乙醇水溶液（氫氧化鈉調(diào)堿至pH8）超聲提取1次，每次3h，抽濾，合并濾液，減壓濃縮無醇，分散于水中，分散液先通過HPD-400大孔樹脂柱，用水洗至中性，洗液棄去，再用5L70%乙醇（鹽酸調(diào)節(jié)pH5）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成濃度為100mg/ml的溶液，經(jīng)0.45μm微濾膜過濾，制備型高效液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為25ml，以乙腈-1%三氟乙酸（65：35）為流動相，控制流速為100ml/min，紫外檢測器監(jiān)測設(shè)定為254nm，在線檢測，收集含有鞣花酸的高純度流分，濃縮至干即得含量為99.3%的鞣花酸。

實(shí)施例3：