[發明專利]一種從內折香茶菜中提取內折香茶菜乙素的方法

無效

• 申請號: 201110263985.3
• 申請日: 2011-09-08
• 公開（公告）號: CN102311446A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發明（設計）人: 劉東鋒;郭琴
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，涉及一種從內折香茶菜中提取內折香茶菜乙素的方法。

背景技術

內折香茶菜乙素是一種二萜類化合物，分子式為C₂₀H₂₆O₅，分子量為346.42，主要存在于唇形科內折香茶菜的莖葉中，資源豐富。藥理研究表明，內折香茶菜乙素具有抗腫瘤活性，對體外和體內的艾氏腹水癌（Ehrlich?ascites?carcinoma，ECA）腫瘤細胞有明顯的抑制作用，并且還具有抗菌活性，對金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和白色念珠菌有很強的抑菌作用，可作為一種有前途的抗腫瘤藥物，值得深入開發與研究。目前，對內折香茶菜乙素的研究較少，經檢索，尚未發現適宜于大量制備內折香茶菜乙素的工業化方法的公開報道。

發明內容

針對上述情況，本發明的目的是提供一種從內折香茶菜中提取內折香茶菜乙素的方法，可有效解決從內折香茶菜中提取內折香茶菜乙素的問題。

本發明的技術構思是這樣的：

本發明結合幾種提取純化方法，摸索出了一種適合提取純化內折香茶菜乙素的方法。采用醇溶液索氏提取，提取液濃縮上大孔樹脂，除去多糖、色素等雜質，再采用溶劑萃取及制備液相色譜精制純化，得到高純度的內折香茶菜乙素。

本發明是通過如下技術方案實現的：

將內折香茶菜葉粉碎，經60-95%乙醇或甲醇溶液浸泡1-2h，加熱至80-95℃索氏提取提取4-10h，提取液減壓回收至無醇味，加水分散，上大孔吸附樹脂柱，洗脫液濃縮，用乙醚萃取，萃取液濃縮干燥得內折香茶菜乙素粗品，用反相高效液相色潽法精制得到內折香茶菜乙素對照品，純度達98%以上。

所述大孔吸附樹脂型號可選AB-8、D101、HP20、HZ841、LDA-10等。

所述大孔吸附樹脂洗脫溶劑為乙醇或丙酮溶液，先用10-30%乙醇或丙酮溶液洗脫，再用50-80%乙醇或丙酮溶液洗脫，收集50-80%的乙醇或丙酮洗脫液。

所述反相高效液相色潽法色譜條件為：流動相為乙腈-水，乙腈與水的體積比為（30-40）：（60:70），流速20-50ml/min，檢測波長233nm。

本發明的有益效果是：采用索氏提取，可實現連續提取，同時濃縮提取液，既節約溶劑，又提高了萃取率；通過大孔樹脂吸附洗脫，提高了產品的純度；采用反相高效液相色潽法精制純化，純度高達98%以上，所得產品可作為對照品使用，同時可進行大量制備；本發明工藝穩定，可用于工業化生產。

具體實施方式

下面結合具體實施方式對本發明進行進一步說明。

實施例1：

將內折香茶菜莖葉粉碎，稱取1000g，加入相當于原料量3倍的80%甲醇溶液浸泡2h，然后加熱至80-90℃索氏提取6h，收集提取液取液減壓回收甲醇至無醇味，加水溶解分散，離心，上清液上HZ841大孔吸附樹脂柱，依次用水沖柱至洗脫液流出無色、用20%乙醇溶液沖柱至洗脫液流出無色，最后用60%乙醇溶液沖柱至洗脫液流出無色，收集60%乙醇洗脫液，減壓濃縮，用乙醚反復萃取6次，萃取液濃縮干燥得內折香茶菜乙素粗品。將內折香茶菜乙素粗品用甲醇溶解，微孔濾膜濾過，經制備高效液相色譜分離，色譜柱：C18，流動相：乙腈-水（32:68），流速25ml/min，以紫外檢測器檢測指導產品收集，檢測波長233nm，連續進樣，收集含有內折香茶菜乙素的高純度流分，濃縮干燥得產品119mg，含量為98.6%。

實施例2：

將內折香茶菜莖葉粉碎，稱取1000g，加入相當于原料量5倍的75%乙醇溶液浸泡2h，然后加熱至85-90℃索氏提取8h，收集提取液取液減壓回收乙醇至無醇味，加水溶解分散，離心，上清液上AB-8大孔吸附樹脂柱，依次用水沖柱至洗脫液流出無色、用10%丙酮溶液沖柱至洗脫液流出無色，最后用50%丙酮溶液沖柱至洗脫液流出無色，收集50%丙酮洗脫液，減壓濃縮，用乙醚反復萃取5次，萃取液濃縮干燥得內折香茶菜乙素粗品。將內折香茶菜乙素粗品用甲醇溶解，微孔濾膜濾過，經制備高效液相色譜分離，色譜柱：C18，流動相：乙腈-水（40:60），流速20ml/min，以紫外檢測器檢測指導產品收集，檢測波長233nm，連續進樣，收集含有內折香茶菜乙素的高純度流分，濃縮干燥得產品117mg，含量為98.7%。

實施例3：