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[發明專利]一種檢測血液中鉀離子含量的試劑及制備方法及含有該試劑的試劑盒無效

專利信息
申請號: 201110263293.9 申請日: 2011-09-07
公開(公告)號: CN102417925A 公開(公告)日: 2012-04-18
發明(設計)人: 徐維琛;朱進清;高玉蘭;程志敬 申請(專利權)人: 天津希恩思生化科技有限公司
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68;C12Q1/34
代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209 代理人: 王來佳
地址: 300384 天津市西青區濱海高*** 國省代碼: 天津;12
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 檢測 血液 離子 含量 試劑 制備 方法 含有 試劑盒
【說明書】:

技術領域

發明屬于檢測試劑盒領域,尤其是一種檢測血液中鉀離子含量的試劑及制備方法及含有該試劑的試劑盒。

背景技術

鉀是人體所必需的微量元素,約占人體重的0.2%。鉀元素在維持人體正常生理功能上起非常重要的作用。鉀是調節細胞內外滲透壓平衡的重要元素;也是維持人體神經系統功能必不可少的元素;鉀離子通過進出鉀離子通道,對細胞膜的電位平衡,神經信號的傳導和肌肉控制,起到很重要的作用。作為氫離子的取代,鉀離子在細胞內外的酸堿平衡中也起到關鍵的作用。另外,鉀離子參與了人體內重要的生物化學過程,例如三磷酸腺苷(ATP)的合成,糖原的合成,某些鹽皮質激素如醛固酮的分泌等。鉀離子還能通過對端粒(telomere)結構的調控從而對細胞凋亡和癌癥形成產生重大影響。

人體內的鉀元素以離子形式存在;絕大部分鉀離子存在于細胞液和血液中。在血液中鉀的正常濃度范圍在3.5至5mEq/L;而在細胞液中鉀的濃度約為140mEq/L。如果血液中的鉀離子濃度(血鉀)低于正常范圍,就會產生一系列諸如腹瀉、嘔吐、肌肉無力及其心律失常等癥狀,長期以往則會對腎功能產生極大損害。如果血鉀高于正常范圍,則有疲勞、心律不齊和房顫等癥狀。血鉀水平異常的癥狀沒有特異性,所以臨床診斷血鉀異常必須測定血鉀水平。

目前血鉀的測量屬于常規檢測,檢測手段主要有原子吸收法、離子選擇電極法、酶法、熒光比色法等。檢測方法的比較見表1。

表1現有血鉀檢測方法的比較

原子吸收法靈敏度高選擇性好,但是操作復雜。熒光比色法和離子選擇電極法操作簡便,但是對鈉的選擇性較差。酶法價格昂貴且操作復雜。

脫氧核糖核酸(DNA)除了具有保存遺傳信息的功能外,在上世紀九十年代發現DNA的一些片段具有催化生化甚至有機反應的作用。這些具有催化作用的DNA片段被成為核酸酶(DNAzyme)。目前所有的核酸酶都是在實驗室中通過人工選擇(in?vitro?selection)獲得的。在人工選擇的過程中,通過人為的控制反應條件,可使得人工選擇的核酸酶具有極好的選擇性和符合需求的催化活性。

生化分析是核酸酶目前最重要的應用。核酸酶被應用于金屬離子例如鋅、鉛、銅和鈾,以及特定核酸序列的檢測。基于核酸酶的生物傳感器一般具有很高的選擇性和符合要求的靈敏度,跟化學傳感器相比,具有水溶性好和抗干擾力強的特點,但是,核酸酶在水溶液中的穩定性差,熒光標記的核酸分子價格昂貴,所以核酸酶在生化分析中的應用得到限制,目前的研究狀況離實際應用還有較大的差距。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足之處,提供一種選擇性高、靈敏度高和使用方便的檢測血液中鉀離子含量的試劑及制備方法及含有該試劑的試劑盒。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的:

一種檢測血液中鉀離子含量的試劑,包括核酸分子、血紅素和魯米諾試劑,所述核酸分子為可形成四鏈體結構的富于鳥苷的寡核苷酸,序列公式為R-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-R′,其中m、n為整數。

而且,所述核酸分子和血紅素以及魯米諾試劑的摩爾比是1∶10∶1000。

而且,所述核酸分子如下:

??序列??5′-GGG-ATT-GGG-ATT-GGG-ATT-GGG??5′-GGGG-ATT-GGGG-ATT-GGGG-ATT-GGGG??5′-GGGGG-ATT-GGGGG-ATT-GGGGG-ATT-GGGGG??5′-TAATGGGG-ATT-GGGG-ATT-GGGG-ATT-GGGG-TAAT??5′-ACTTAATGGGG-ATT-GGGG-ATT-GGGG-ATT-GGGGACTTAAT

一種檢測血液中鉀離子含量的試劑的制備方法,包括如下步驟:

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