[發(fā)明專利]復合蛋白膠黏劑的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110262489.6
• 申請日: 2011-08-31
• 公開（公告）號: CN102965070A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發(fā)明（設計）人: 歐陽小琨;楊立業(yè);吳偉建;李維娜;萬雄
• 申請（專利權）人: 浙江海洋學院
• 主分類號: C09J189/00
• 分類號: C09J189/00;C08H1/00
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛(wèi)

1.一種復合蛋白膠黏劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)貽貝蛋白粉的制備：稱取干凈貽貝肉，加少量0.015～0.025mol·L^-1PBS緩沖溶液，用組織搗碎機搗碎；加入1.5～2.5倍液固比(v/w)的PBS緩沖溶液緩慢攪拌20～40min，在3～5℃提取20～28h，然后離心處理，取上清液；將提取的貽貝粗提液，在冰浴條件下，緩慢加入過量(NH₄)₂SO₄細顆粒，邊加邊攪拌，待(NH₄)₂SO₄細顆粒完全溶解，靜置20～28h后低溫高速離心，得貽貝(NH₄)₂SO₄沉淀蛋白，將沉淀蛋白用1.5～2.5倍液固比(v/w)的PBS緩沖溶液溶解，在3～5℃，PBS緩沖溶液透析過夜，冷凍干燥成粉，備用；

2)配制堿尿復合變性劑：取一定量的水，加入一定量的堿，使水溶液的pH值為9-10.5，然后加入一定量的尿素，使尿素的濃度為2～3.5mol/L得到堿尿復合變性劑；

3)在堿尿復合變性劑中加入1，2-苯并異噻唑啉-3-酮，使1，2-苯并異噻唑啉-3-酮的質量濃度為0.09～0.11％；

4)將步驟1)制得的貽貝蛋白粉與大豆蛋白按照貽貝蛋白粉占20～80％的質量比例混勻后，加入到步驟3)配制的溶液中，使液固比為10～15mL/g，于室溫下攪拌2～4小時，使各組分充分均勻混合、反應，制得復合蛋白膠粘劑。

2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟1)中的離心處理為二次離心，轉速分別為4000～6000r·min^-1、13000～15000r·min^-1，時間分別為10～20min，15～25min。

3.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟1)中的低溫高速離心是在3～5℃轉速為13000～15000r·min^-1。

4.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟1)中貽貝肉組織搗碎機搗碎后加入2倍液固比(v/w)的PBS緩沖溶液，緩慢攪拌30min，在4℃提取24h。

5.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟1)中貽貝(NH₄)₂SO₄沉淀蛋白用2倍液固比(v/w)的PBS緩沖溶液溶解，在4℃，PBS緩沖溶液透析過夜。

6.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟2)中的堿為氫氧化鈉。

7.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟3)中1，2-苯并異噻唑啉-3-酮的質量濃度為0.1％.

8.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟4)中貽貝蛋白粉與大豆蛋白按照貽貝蛋白粉占60％的質量比例混勻。