[發明專利]一種利用細麗毛殼菌發酵制備右旋糖酐酶粗酶的方法

無效

• 申請號: 201110261291.6
• 申請日: 2011-09-06
• 公開（公告）號: CN102399770A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 陸海勤;麻少瑩;杭方學;謝彩鋒;李凱;郭海蓉;蘇佳廷
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12N9/46
• 分類號: C12N9/46;C12R1/645
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 王素娥

技術領域

本發明涉及一種右旋糖酐酶的制備方法，尤其涉及一種利用細麗毛殼菌發酵制備右旋糖酐酶粗酶的方法。?

技術背景

關于減少右旋糖酐生成對制糖生產過程以及產品質量的影響，目前國內主要以加強甘蔗新鮮度與在生產過程中注意清潔衛生及使用殺菌劑為主，但甘蔗從田頭到整個生產過程，經歷的時間一般在3～7天左右，微生物的繁殖是不可避免的。右旋糖酐的生成，影響制糖生產操作，減少蔗糖收回率，影響產品質量。利用右旋糖酐酶將右旋糖酐分解成小分子糖類，是一種有效的降低右旋糖酐對制糖過程影響的有效方法。?

焦曲霉、淡紫擬青霉、繩狀青霉、畢赤酵母等菌株均可發酵生產右旋糖酐酶。本發明利用細麗毛殼菌發酵生產右旋糖酐酶在國內還未見有相關報導。?

發明內容

本發明的目的是提供一種利用細麗毛殼菌發酵制備右旋糖酐酶粗酶的方法。?

本發明解決上述技術問題的技術方案如下。?

一種利用細麗毛殼菌發酵制備右旋糖酐酶粗酶的方法，是在培養基中加入細麗毛殼菌進行發酵培養，然后經離心分離得到的上清液即為右旋糖酐酶粗酶，具體操作步驟如下：?

1.在250mL搖瓶中加入15～50mL培養基和細麗毛殼菌種液，細麗毛殼菌種液的量是培養基體積的6％～16％；培養基為馬鈴薯浸取液、水、葡萄糖，?它們的重量百分比為：馬鈴薯浸取液∶水∶葡萄糖＝90～98％∶1～5％∶1～5％。?

2.發酵培養：將步驟1)的搖瓶放在搖床中，控制搖床轉速為0～200r/min、溫度為25～28℃，進行發酵培養0～48h，得到菌種培養液。?

3.離心分離：將菌種培養液在溫度為4℃的離心機中離心5～15min，離心機的轉速為2000～4700r/min；取其上清液，即為右旋糖酐酶粗酶液。?

本發明的有益效果是：本發明所提供的右旋糖酐酶粗酶的制備方法工藝簡單，成本低，所得右旋糖酐酶粗酶對制糖生產過程中產生的右旋糖酐降解效果好。?

具體實施方式

下面結合實施例對發明作進一步描述。?

實施例1?

按重量計算將馬鈴薯浸取液170克，葡萄糖3.0克，水5克，以此作為培養基分裝至6個250mL錐形瓶，裝液量為25mL，加入1.5mL細麗毛殼菌種培養液，在搖床轉速為200r/min，溫度在25～28℃間進行培養48小時，得到菌種培養液；將菌種培養液在溫度為4℃的離心機中離心5min，離心機的轉速為4700r/min。取其上清液，即右旋糖酐酶粗酶液。?

實施例2?

按重量計算將馬鈴薯浸取液180克，葡萄糖4.0克，水8克以此作為培養基分裝入250mL錐形瓶，裝液量為50mL，加入8mL細麗毛殼菌種培養液，在搖床轉速為100r/min，溫度在25～28℃之間進行培養24小時，得到菌種培養液；將菌種培養液在溫度為4℃的離心機中離心15min，離心機的轉速為2000r/min。取其上清液，即右旋糖酐酶粗酶液。?