[發(fā)明專利]一種側(cè)孢芽孢桿菌及利用該細(xì)菌制備的微生物菌種劑、微生物肥料以及它們的制備方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110260433.7 | 申請日: | 2011-09-05 |
| 公開(公告)號: | CN102399710A | 公開(公告)日: | 2012-04-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 麻林濤;王莉 | 申請(專利權(quán))人: | 麻林濤;王莉 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C05G1/00;C12R1/07 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100070 北京市豐臺*** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 芽孢 桿菌 利用 細(xì)菌 制備 微生物 菌種 肥料 以及 它們 方法 | ||
1.一種側(cè)孢芽孢桿菌(Bacillus?laterosporus),其特征在于它在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為CGMCC?No.5090。
2.一種側(cè)孢芽孢桿菌微生物菌種劑,其特征在于該菌種劑由側(cè)孢芽孢桿菌經(jīng)培養(yǎng)發(fā)酵然后與草炭土混合造粒而得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的側(cè)孢芽孢桿菌微生物菌種劑,其特征在于該微生物菌種劑由如下方法制備而成:
1)將CGMCC?No.5090菌株劃線接入斜面培養(yǎng)基(新1培養(yǎng)基),30—38℃培養(yǎng)箱靜置黑暗條件下培養(yǎng)36小時;
2)用無菌水沖洗斜面,形成菌懸液;
3)將1體積菌懸液接入20體積的新1液體培養(yǎng)基中,30—38℃有氧培養(yǎng)至菌體濃度為108?個/ml數(shù)量級;
4)將步驟3)得到的菌懸液加入到5-10倍體積的新2培養(yǎng)基中,30—38℃有氧培養(yǎng)至菌體濃度為108個/ml數(shù)量級;
5)將步驟4)得到的菌懸液加入到50-100倍體積的新3培養(yǎng)基中,35-38℃有氧培養(yǎng)至菌體濃度為?108個/ml數(shù)量級;
6)將步驟5)得到的菌懸液加入到5-10倍體積的新4培養(yǎng)基中,35-38℃培養(yǎng)有氧培養(yǎng)至菌體濃度為109個/ml數(shù)量級,停止發(fā)酵;然后按1:2-10的比例與草炭土混合,造粒,低溫烘干獲得微生物菌種劑;
其中上述培養(yǎng)基為:新1號培養(yǎng)基(斜面培養(yǎng)基):蛋白胨5g/L,氯化鈉5g/L,牛肉膏5g/L,瓊脂1.5%-2.0%,?PH調(diào)至6.5-7.8,
新1號液體培養(yǎng)基:該培養(yǎng)基不含瓊脂,其他成分和含量與新1培養(yǎng)基相同,?PH調(diào)至6.5-7.8,
新2號培養(yǎng)基:淀粉5g/L,蔗糖1g/L,酵母浸出汁0.2g/L,蛋白胨5g/L,牛肉膏5g/L,硫酸銨1g/L,磷酸二氫鉀0.5g/L,硫酸鎂0.2g/L,氯化鈉5g/L,?PH調(diào)至6.5-7.8,
新3號培養(yǎng)基:淀粉10g/L,蔗糖5g/L,酵母浸出汁0.1g/L,蛋白胨0.5g/L,豆餅粉10g/L,硫酸銨1g/L,磷酸二氫鉀0.5g/L,氯化鈉5g/L,?PH調(diào)至6.5-7.8,
新4號培養(yǎng)基:淀粉10g/L,蔗糖2.5g/L,酵母浸出汁0.1g/L,蛋白胨0.5g/L,豆餅粉5g/L,硫酸銨1g/L,磷酸二氫鉀0.5g/L,氯化鈉5g/L,?PH調(diào)至6.5-7.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的側(cè)孢芽孢桿菌微生物菌種劑,其特征在于該微生物菌種劑由如下方法制備而成:
?將CGMCC?No.5090菌株活化后接入1000ml培養(yǎng)基:淀粉10%,豆餅粉10%,磷酸氫二鉀0.2%,硫酸銨0.1%,硫酸鎂0.05%,氯化鐵0.001%,碳酸鈣0.01%,酵母膏0.01%,PH7.2-7.4中,三角瓶搖瓶160RPM,30—38℃培養(yǎng)16小時,然后按1%接種量接種到200L種子發(fā)酵罐中(仍為上述同種培養(yǎng)基),通氣,30—38℃培養(yǎng)16小時,再按10%接種量接到2000L發(fā)酵罐中(仍為上述同種培養(yǎng)基),30—38℃培養(yǎng)20小時后升溫至40—45℃在培養(yǎng)10小時,待80%菌體產(chǎn)生芽孢后停止發(fā)酵;然后按1:2-10的比例與草炭土混合,造粒,低溫烘干獲得微生物菌種劑。
5.一種微生物肥料,其特征在于該肥料由權(quán)利要求2-4之一所述的側(cè)孢芽孢桿菌微生物菌種劑與常規(guī)化肥和/或有機載體混合而成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物肥料,其中所述的常規(guī)化肥為氮肥、磷肥和/或鉀肥,所述的有機載體為雞糞、粉碎玉米芯和/或煤渣。
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