[發明專利]甲胎蛋白抗原表位肽及核酸及制法、重組載體及宿主細胞、雜交瘤細胞及單抗和試劑盒

有效

• 申請號: 201110258702.6
• 申請日: 2011-09-02
• 公開（公告）號: CN102321167A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 北京利德曼生化股份有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/12;C12N15/10;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/20;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 北京銀龍知識產權代理有限公司 11243
• 代理人: 金鮮英;馮云

1.一種甲胎蛋白的抗原表位肽，其特征在于，所述抗原表位肽的氨基酸序列為

(1)SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列，或者

(2)SEQ?ID?NO：3所示的氨基酸序列，或者

對(1)或(2)所述的氨基酸序列進行一個或幾個氨基酸的缺失、添加和/或取代，但其甲胎蛋白抗原表位肽的功能不變的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述的抗原表位肽，其中，所述抗原表位肽的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：1或SEQ?ID?NO：3所示的氨基酸序列。

3.一種編碼甲胎蛋白的抗原表位肽的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列為編碼權利要求1或2所述的甲胎蛋白抗原表位肽的核苷酸序列。

4.根據權利要求3所述的核苷酸序列，其中，所述核苷酸序列為

(1)SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列；或者

(2)SEQ?ID?NO：4所示的核苷酸序列，或者

(3)對SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：4所示的核苷酸序列進行一個或幾個核苷酸取代、缺失或增加而得到的核苷酸序列，該核苷酸序列編碼的甲胎蛋白抗原表位肽的功能不變。

5.根據權利要求3所述的核苷酸序列，其中，所述核苷酸序列為SEQ?IDNO：2或SEQ?ID?NO：4所示的核苷酸序列。

6.一種制備權利要求3-5中任意一項所述的編碼甲胎蛋白抗原表位肽的核苷酸序列的方法，所述方法包括：

擴增SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列所用引物：

正向引物5’-CATGCCATGGGACATTCAGAC-3’

反向引物5’-CCGCTCGAGGCATTCAACTGC-3’

擴增SEQ?ID?NO：4所示的核苷酸序列所用引物：

正向引物5’-CATGCCATGGAACGTGGTCAATG-3’

反向引物5’-CCGCTCGAGCTCCTGGTATCC-3’

使用以上引物對并以RT-PCR體外擴增甲胎蛋白基因片段為模板，合成編碼甲胎蛋白抗原表位肽的核苷酸序列。

7.一種重組載體，其特征在于，所述重組載體由空載體和插入該空載體的目的基因組成，所述目的基因為權利要求3-5中任意一項所述的編碼甲胎蛋白抗原表位肽的核苷酸序列。

8.根據權利要求7所述的重組載體，其特征在于，所述空載體選自由pET-28a(+)、pKK223-3、pEX1/2/3和pUC18所組成的組中。

9.一種重組宿主細胞，其特征在于，所述重組宿主細胞含有權利要求7-8任意一項所述的重組載體。

10.根據權利要求9所述的重組宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為大腸桿菌DH5α和/或大腸桿菌BL21。

11.一種單克隆抗體雜交瘤細胞，其特征在于，所述單克隆抗體雜交瘤細胞的保藏號為CGMCC?No.5193或CGMCC?No.5194。

12.一種單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體是針對權利要求1或2所述的甲胎蛋白的抗原表位肽的單克隆抗體，其由保藏號為CGMCC?No.5193或CGMCC?No.5194的雜交瘤產生。

13.一種檢測甲胎蛋白的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：

權利要求1或2所述的甲胎蛋白的抗原表位肽和/或權利要求12所述的單克隆抗體。